Estudos anatômicos da organogênese in vitro de soja e otimização do processo de transformação via Agrobacterium tumefaciens (1999)
- Authors:
- Autor USP: ALVES, ADRIANA CRISTINA - ESALQ
- Unidade: ESALQ
- Sigla do Departamento: LGN
- Subjects: PLANTAS CULTIVADAS (FISIOLOGIA); PLANTAS OLEAGINOSAS; PLANTAS CULTIVADAS (MELHORAMENTO;GENÉTICA)
- Language: Português
- Abstract: Com o objetivo de se determinar os tipos celulares capazes de originar gemas adventícias em soja [Glycine max (L.) Merrill], assim como a localização das áreas meristemáticas, estudou-se o processo de diferenciação in vitro através de análisesanatômicas. Utilizando-se como explantes nós cotiledonares, excisados aos 14 dias após a germinação in vitro, foi observado que as áreas meristemáticas localizadas na superfície do explante são formadas pela rediferenciação de células daepiderme e das primeiras camadas do parênquima cortical, caracterizando sua origem exógena, sendo que as gemas adventícias formam-se diretamente sobre o tecido do explante. A utilização de BAP durante a germinação das sementes foi umpré-condicionamento para a formação das gemas. Neste estudo, também foram realizados ensaios para a otimização do processo de transformação via Agrobacterium. O emprego de ferimentos durante a inoculação da bactéria, visando alcançar células nointerior do explante, não é necessário, uma vez que as células meristemáticas estão localizadas superficialmente e em processo ativo de divisão no início da cultura, fator importante na transformação genética. Em 12 experimentos foram avaliadosa adição e concentração de acetoseringona em meio de cultura e na cultura bacteriana, pH, temperatura, tempo de co-cultivo, meio de inoculação, concentração de células bacterianas, co-cultivo e pré-cultivo do explante na presença de6-benzilaminopurina,linhagens bacterianas e ferimento no explante, totalizando 22 tratamentos. A análise dos experimentos foi baseada no número de explantes apresentando reação positiva para o teste GUS e também no número de pontos azuis, sobreo qual foi feita uma análise de 'x POT.2'. Pelo observado, nenhum dos tratamentos apresentou mais do que 10% de explantes GUS positivos. Na maior parte dos tratamentos, 100% dos pontos azuis foram encontrados em regiões não meristemáticas, comoepicótilos, ) cotilédones e bases do cotilédone. Em experimentos posteriores, quando o co-cultivo foi realizado empregando-se as linhagens do Agrobacterium AGL1, EHA105 e GV2260, sob dois níveis de pH (5,0 e 5,8) e duas temperaturas (25 e '28GRAUS'C), observou0es que Agrobacterium comporta-se de maneira diferenciada conforme a combinação de pH e temperatura. Somente a linhagem GV2260 teve comportamento similar nas combinações. Todas as combinações foram acompanhadas de aumento daexpressão do gene repórter em áreas meristemáticas em relação aos experimentos iniciais. A localização histológica do produto da expressão do gene repórter uidA mostrou que esta ocorre em células da epiderme e do parênquima cortical, sendo estesos mesmos tipos celulares envolvidos na formação das gemas adventícias em nós cotiledonares de soja. Esta coincidência suporta a possibilidade de obtenção de plantas transgênicas de soja, utilizando-se como vetor Agrobacterium tumefaciens
- Imprenta:
- Publisher place: Piracicaba
- Date published: 1999
- Data da defesa: 30.06.1999
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ABNT
ALVES, Adriana Cristina. Estudos anatômicos da organogênese in vitro de soja e otimização do processo de transformação via Agrobacterium tumefaciens. 1999. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Piracicaba, 1999. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20191108-121512/. Acesso em: 02 maio 2024. -
APA
Alves, A. C. (1999). Estudos anatômicos da organogênese in vitro de soja e otimização do processo de transformação via Agrobacterium tumefaciens (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20191108-121512/ -
NLM
Alves AC. Estudos anatômicos da organogênese in vitro de soja e otimização do processo de transformação via Agrobacterium tumefaciens [Internet]. 1999 ;[citado 2024 maio 02 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20191108-121512/ -
Vancouver
Alves AC. Estudos anatômicos da organogênese in vitro de soja e otimização do processo de transformação via Agrobacterium tumefaciens [Internet]. 1999 ;[citado 2024 maio 02 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20191108-121512/
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