Parâmetros de amplificação e clonagem do gene de lectina de fruta-pão seminífera (Artocarpus incisa) (2001)
- Authors:
- Autor USP: POVINELI, KAREN LENTINI - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBA
- Subjects: FRUTAS TROPICAIS (ANÁLISE QUÍMICA); ALIMENTOS DE ORIGEM VEGETAL (ANÁLISE QUÍMICA); BIOQUÍMICA DE ALIMENTOS; CIÊNCIA DE ALIMENTOS
- Language: Português
- Abstract: A frutalina e a uma lectina da fruta-pão que está contida na semente do fruto, semelhante a uma castanha, que também é consumida como alimento. Neste trabalho foram estudados os processos de amplificação e clonagem do gene responsável pela expressão da frutalina em sementes de fruta-pão (Artocarpus incisa). Com o conhecimento da seqüência de bases da lectina de jaca (A. integrifolia) e dos aininoácidos N-terminais da fruta-pão foram sintetizados oligonucleotídeos para as reações de amplificação pela polimerase (PCR). A extração do DNA genômico foi otimizada a partir de sementes imaturas. Foram ensaiadas, reações em variadas condições de concentração de reagentes, de amostra, de enzima e de parâmetros de operação do termociclador. Os fragmentos de DNA amplificados a partir de oligonucleotídeos posicionados nas extremidades 5' e 3' apresentaram-se com cerca de 1100 pb. Estes produtos foram ligados a vetores pBluescript SK e pUC 18 através de reação com T4 DNA ligase. Células competentes foram transformadas, resultando clones que continham fragmentos com aproximadamente 1600 pb, 1700 pb e 1750 pb. A partir de RNA/cDNA foram amplificados fragmentos intermediários e inteiros que apresentaram resultados previstos em tomo de 500, 1 100 e 1700 bp, reforçados pela clonagem do fragmento com cerca de 1100 bp. Os resultados indicam que o fragmento de DNA da fruta-pão clonado corresponde ao gene da frutalina
- Imprenta:
- Data da defesa: 18.12.2001
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ABNT
POVINELI, Karen Lentini. Parâmetros de amplificação e clonagem do gene de lectina de fruta-pão seminífera (Artocarpus incisa). 2001. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2001. . Acesso em: 01 jun. 2024. -
APA
Povineli, K. L. (2001). Parâmetros de amplificação e clonagem do gene de lectina de fruta-pão seminífera (Artocarpus incisa) (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Povineli KL. Parâmetros de amplificação e clonagem do gene de lectina de fruta-pão seminífera (Artocarpus incisa). 2001 ;[citado 2024 jun. 01 ] -
Vancouver
Povineli KL. Parâmetros de amplificação e clonagem do gene de lectina de fruta-pão seminífera (Artocarpus incisa). 2001 ;[citado 2024 jun. 01 ]
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