Análise funcional da molécula de adesão celular Roughest durante o desenvolvimento de Drosophila melanogaster (2003)
- Authors:
- Autor USP: MODA, LIVIA MARIA ROSATTO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: DROSOPHILA (DESENVOLVIMENTO); BIOLOGIA CELULAR; BIOLOGIA MOLECULAR
- Language: Português
- Abstract: Roughest (Rst) é uma glicoproteína transmembrana da superfamília das imunoglobulinas envolvida em diversos processos pós-embrionários que ocorrem durante o desenvolvimento de Drosophila melanogaster, entre eles direcionamento axonal do lobo óptico, morte celular programada e diferenciação das. células pigmentares do olho composto, padronização dos órgãos sensoriais da antena e histólise das glândulas salivares. No entanto, seu mRNA é expresso em um padrão complexo e dinâmico, temporal e espacialmente, não apenas em larvas de terceiro ínstar e pupa como também durante a embriogênese, sendo observado inicialmente no estágio 4 (1:30 a 2:30 horas após a fertilização, a 25°C) e continuando pelo menos até o estágio 14 (10:30 a 11:30 horas após a fertilização, a 25°C). Experimentos prévios realizados em nosso laboratório (MACHADO 1997; MODA et al 2000), visando explorar possíveis funções de rst durante a embriogênese, haviam demonstrado que embriões transgênicos expressando de forma generalizada a construção pCa18'delta'3.1, contendo uma versão truncada do cDNA de rst codificando somente o domínio extra celular da proteína, apresentavam uma diminuição significativa de sua viabilidade. Este fenótipo era realmente devido à expressão generalizada do domínio extra celular e não a uma inativação parcial de funções genéticas causadas pela inserção do transgene, uma vez que idêntico resultado foi obtido empregando-se linhagens adicionais geradas a partir da mobilização "invivo" da construção original. Neste trabalho foi analisada em detalhe a expressão da porção extracelular de Rst na linhagem P[w+pCa18'delta'3.1-3C] durante a embriogênese e durante os períodos pós-embrionários. A expressão do transgene em pequenos intervalos de tempo durante a embriogênese levou à identificação de dois períodos independentes de letalidade, um quando os embriões são submetidos ao choque térmico de 8-10 horas e outro de ... 0-2 horas. A análise fenotípica do período de letalidade mais tardio mostrou que indivíduos expressando o transgene apresentam severa desorganização da musculatura somática, e grande número de mioblastos não fundidos, sugerindo, pela primeira vez, que a expressão regulada de rst é importante pata o processo de miogênese embrionária. Foi mostrado também que a superexpressão de Rst nas primeiras duas horas de desenvolvimento embrionário leva a um desacoplamento entre os processos de divisão nuclear e de formação dos sulcos de clivagem, que definem a transição do blastoderma sincicial para o celular. Pôde-se ainda verificar que a imunoreatividade anti-Rst destes embriões transgênicos em fase inicial de celularização parece estar concentrada nas áreas de formação da membrana plasmática. Tendo em vista que esta proteína truncada não possui uma região transmembrana, podendo assim ser secretada para o espaço extracelular, é possível que este fenótipo seja devido à associação desta proteína truncadacom alguma outra proteína ainda não identificada, desempenhando um papel nesses processos de desacoplamento observados. Os efeitos da expressão do transgene pCa18'delta'3.1 nos estágios pós-embrionários foram também analisados. Não se observou letalidade no período larval, e a superexpressão da porção extracelular no estágio pupal revelou redução de viabilidade bem como persistência de glândulas salivares 22 horas após a formação do pupário. Estes últimos resultados confirmam observações prévias (OCTACÍLIO- SILVA, 2003; SIMON et al, em preparação) de que a correta. expressão de rst é necessária para a histólise das glândulas salivares no início do período pupal. Tomados em conjunto, os resultados aqui apresentados contribuem para uma melhor compreensão das funções do gene rst durante o desenvolvimento de Drosophila melanogaster
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2003
- Data da defesa: 16.10.2003
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ABNT
MODA, Lívia Maria Rosatto. Análise funcional da molécula de adesão celular Roughest durante o desenvolvimento de Drosophila melanogaster. 2003. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2003. . Acesso em: 16 maio 2024. -
APA
Moda, L. M. R. (2003). Análise funcional da molécula de adesão celular Roughest durante o desenvolvimento de Drosophila melanogaster (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Moda LMR. Análise funcional da molécula de adesão celular Roughest durante o desenvolvimento de Drosophila melanogaster. 2003 ;[citado 2024 maio 16 ] -
Vancouver
Moda LMR. Análise funcional da molécula de adesão celular Roughest durante o desenvolvimento de Drosophila melanogaster. 2003 ;[citado 2024 maio 16 ]
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