Alterações celulares relacionadas com a sensibilidade ao alumínio em Nicotiana tabacum L. cv. BY-2 (2004)
- Authors:
- Autor USP: SOUZA, CLOVIS ARRUDA DE - CENA
- Unidade: CENA
- Assunto: EXOCITOSE
- Language: Português
- Abstract: A sensibilidade celular ao alumínio (Al) depende do estado fisiológico ou de desenvolvimento das células Em plantas, as células da zona de transição distal da raiz são particularmente sensíveis ao Al. Nesta região, as células encontram-se em uma fase preparatória para a rápida expansão celular. Assim como, os pêlos radiculares em expansão que também são sensíveis ao Al, mas não as células epidérmicas vizinhas. Em suspensão celular, as células que se encontram na fase logarítmica de crescimento da cultura são sensíveis e acumulam Al, enquanto que as células na fase estacionária de crescimento tolerantes e acumulam muito pouco Al) Estas mesmas células em crescimento perdem sua sensibilidade ao Al quando induzidas a um estado de repouso pela retirada temporária de nutrientes do meio (< 3h). Os objetivos deste trabalho foram: (A) otimizar a condução de uma cultura de células de Nicotiana tabacum cv. BY-2 (TBY2), quanto à comutação entre modos de crescimento celular: (a1) pela manipulação composição do meio de crescimento celular; (a2) pela alteração do regime de subcultivo da suspensão celular (frequência do subcultivo e quantidade de inóculo celular) e (a3) por sincronização do ciclo celular; (B) verificar a existência de diferenças na capacidade celular de acúmulo de Al nas células que tiveram crescimento / desenvolvimento celular alterado; (C) verificar se as alterações capacidade celular de acúmulo de Al (sensibilidade celular) foram moduladas pelociclo celular e explorar a(s) fase(s) do ciclo celular em que a capacidade celular de acúmulo de Al mudou de patamar e (D) verificar se as diferenças na capacidade celular de acúmulo de Al foram dependentes do processo de exocitose celular inibido por cafeína continua... ) Obteve-se mudanças no padrão de desenvolvimento celular, através de (i) uso de reguladores de crescimento vegetal (auxinas e citoquininas) conseguiu-se células sob predominante processo de divisão celular com pouca expansão e também células com predominante elongação celular com pouca divisão celular; (ii) pela retirada temporária de componentes do meio de crescimento celular (ou fósforo, ou sacarose ou 2,4D) e (iii) principalmente pela sincronização do ciclo celular. Houve diferenças na capacidade celular de acúmulo de Al nas células que apresentaram alterações do desenvolvimento celular. Durante o crescimento da cultura observaram-se as diferentes fases de crescimento (lag, logarítmica e estacionária) o maior acúmulo de Al foi verificado no início da fase logarítmica de crescimento. No início da fase logarítmica de crescimento observou-se a maior taxa relativa de crescimento celular da cultura continua ... ) Quando as células foram induzidas a predominância de divisão ou de elongação celular, a maior capacidade celular de acúmulo de Al foi verificada sob processo predominante de divisão celular. As células completamente expandidas tinham baixa capacidade celular de acúmulo de Al. Quandoestas células foram induzidas a re-entrarem em processo de divisão celular também recuperaram a capacidade celular de acúmulo de Al. Em culturas com dois dias de idade, as células se encontram no início da fase logarítmica de crescimento e apresentam o pico máximo de acúmulo de Al. Este pico de acúmulo de Al na suspensão celular crescida em meio de cultura (completo) foi considerado como acúmulo relativo de Al = 100%. Estas células quando foram previamente tratadas / lavadas com meio de cultura incompleto perderam rapidamente a capacidade celular de acúmulo de Al (<3h) continua... ) Já as células de uma cultura na fase estacionária que foram inoculadas em meio de crescimento celular incompleto, tal como restrição de sacarose por até três dias consecutivos apresentaram acentuada alteração na capacidade celular de acúmulo de Al. Durante os primeiros três dias este acúmulo de Al foi muito pequeno, após a re-adição de sacarose às culturas, estas rapidamente recuperaram a capacidade de crescimento celular e o acúmulo de Al nestas condições foi quase que o dobro do pico de acúmulo de Al apresentado pela cultura crescida em meio de cultura (completo). Culturas crescidas por até três dias em meio de cultura modificado 2 (ausência de 2,4D) entraram num processo de expansão celular e a capacidade celular de acúmulo de Al foi menor do que a verificada na cultura mantida sob meio de crescimento completo continua ... ) O retorno da cultura ao meio de cultura (completo) contendoauxina, promoveu a re-entrada em processo de divisão celular e também, observou-se recuperação da capacidade celular de acúmulo de Al a níveis próximos ao da cultura que foi mantida em meio de cultura (completo). Como o processo de divisão celular definitivamente determinou a uma maior capacidade celular de acúmulo de Al das células realizaram-se experimentos de sincronização celular com alta eficiência usando afidicolina e sucessivamente propizamida. Obtiveram-se aproximadamente 90% de células mitóticas no primeiro pico de sincronização celular. Nestas células sincronizadas alíquotas de suspensão celular foram coletadas e submetidas ao ensaio padrão de acúmulo de Al. Em todas as fases do ciclo celular foi observado acúmulo de Al, mas na transição entre a fase M e G1 observou-se um rápido e acentuado aumento (2X) na capacidade de acumular Al. Entre as fases M / G1 ocorre a citocinese celular. As análises por microscopia de epifluorescência ou microscopia confocal de varredura a laser permitiram observar células com acúmulo de Al acentuado na região celular correspondente a placa de divisão celular entre duas células continua ... ) Nos estudos usando o inibidor da formação de placa de divisão celular (cafeína) as células não progrediram no processo de formação da nova parede celular e também o acúmulo de Al não mudou de patamar, como o ocorrido com as células não tratadas com cafeína. Conclui-se que os processos de secreção de membranas e paredes celularesnovas (exocitose) constituem-se nos potenciais alvos da ação tóxica do Al e determina o local celular inicial de maior capacidade de acumular de Al
- Imprenta:
- Publisher place: Piracicaba
- Date published: 2004
- Data da defesa: 22.10.2004
-
ABNT
SOUZA, Clovis Arruda de. Alterações celulares relacionadas com a sensibilidade ao alumínio em Nicotiana tabacum L. cv. BY-2. 2004. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2004. . Acesso em: 31 maio 2024. -
APA
Souza, C. A. de. (2004). Alterações celulares relacionadas com a sensibilidade ao alumínio em Nicotiana tabacum L. cv. BY-2 (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Piracicaba. -
NLM
Souza CA de. Alterações celulares relacionadas com a sensibilidade ao alumínio em Nicotiana tabacum L. cv. BY-2. 2004 ;[citado 2024 maio 31 ] -
Vancouver
Souza CA de. Alterações celulares relacionadas com a sensibilidade ao alumínio em Nicotiana tabacum L. cv. BY-2. 2004 ;[citado 2024 maio 31 ]
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
