Estudo da interação do HAdV-41 com linfócitos T gamma delta (2005)
- Authors:
- Autor USP: HARSI, CHARLOTTE MARIANNA - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivo: comprovar a interação entre linfócitos T gamma delta com HAdV-41 e a permissividade dessas células à infecção por este vírus. Métodos e Resultados: HAdV-41 foi produzido em cultura de células HEK-293 e purificado por gradiente de CsCl. Estes foram titulados por imunofluorescência indireta com células l. A cultura de linfócitos T gamma HEK-293, obtendo-se o título de 12000UFF/ delta, foram obtidas de cultura de explante de biópsia de pele humana. Essas células foram mantidas em DMEM alta glicose enriquecido com 5% de soro humano AB e 25UI de IL-2. Após o estabelecimento da cultura, esta foi infectada com 1 e 5 MOI do HAdV-41 purificado. O mesmo procedimento foi realizado para a cultura permissiva HEK-293. A quantidade de DNA viral intracelular foi determinada por PCR convencional e PCR em tempo real. Para tanto, DNA viral foi extraído das culturas de HEK-293 e purificado pelo protocolo de extração seletiva descrito por HIRT (1967). A quantidade de DNA viral extraído foi determinada por espectrofotometria e a partir desta, diluições seriadas foram preparadas para o estabelecimento do espectro de detecção da reação de PCR em tempo real. A concentração de DNA viral purificado, medido em espectrofometria foi de l. Na PCR convencional foi possível detectar a presença de DNA de g/ 1,37 HAdV-41 até a diluição a 10-5 e na PCR em tempo real esta detecção foi até a diluição de 10-7 (CT31,9) As células HEK-293 infectadas foram positivas no CT28, um valor muito próximodo limiar de detecção da reação. Nos linfócitos infectados não foi possível a detecção do HAdV-41, provavelmente devido ao pequeno número de células disponível. Então o reamplificamos e obtivemos resultado positivo no CT25. No entanto este ciclo de detecção é relativamente alto. Conclusão: Os resultados obtidos ainda são preliminares. Novos testes estão sendo realizados para comprovar a interação do HAdV-41 com linfócitos T gamma delta
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2005
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas
-
ABNT
SILVA, Misael Leonardo e SIQUEIRA-SILVA, J. e HÁRSI, Charlotte Marianna. Estudo da interação do HAdV-41 com linfócitos T gamma delta. 2005, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2005. . Acesso em: 12 jun. 2024. -
APA
Silva, M. L., Siqueira-Silva, J., & Hársi, C. M. (2005). Estudo da interação do HAdV-41 com linfócitos T gamma delta. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Silva ML, Siqueira-Silva J, Hársi CM. Estudo da interação do HAdV-41 com linfócitos T gamma delta. Resumos. 2005 ;[citado 2024 jun. 12 ] -
Vancouver
Silva ML, Siqueira-Silva J, Hársi CM. Estudo da interação do HAdV-41 com linfócitos T gamma delta. Resumos. 2005 ;[citado 2024 jun. 12 ] - Molecular epidemiology of human adenovirus in São Paulo, Brasil
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