Nested polymerase chain reaction validated for sensitive detection of bovine leukemia virus in blood samples from brazilian cattle herds: comparison with conventional Elisa and agar gel immunodiffusion methods (2004)
- Authors:
- USP affiliated authors: GREGORY, LILIAN - FMVZ ; BIRGEL JÚNIOR, EDUARDO HARRY - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Subjects: LEUCOSE BOVINA (DIAGNÓSTICO); REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; TESTES SOROLÓGICOS (VETERINÁRIA); BOVINOS
- Language: Português
- Abstract: A sensibilidade e especificidade de uma nested reação em cadeia da polirnerase (nested PCR) para detecção do virus da leucose bovina (VLB) foi avaliada em amostras de sangue bovino, como uma metodologia confiável para diagnóstico preciso de animais naturalmente infectados. O protocolo de nested PCR padronizado, baseia-se na identificação de fragmentos de 340 pb e 444 pb do DN A de VLB, produzidos pela utilização de 2 diferentes conjuntos de primers do gene env proviral. Este protocolo foi validado através de testes em 40 amostras de sangue bovino de um rebanho leiteiro VLB positivo e pela comparação dos resultados como diagnóstico sorológico por imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e por ensaio imunoenzimático (ELISA). O protocolo de nested PCR foi capaz de discriminar animais infectados dentre aqueles que foram diagnosticados sorologicamente como negativos. Esse ensaio mostrou ter aplicabilidade, também, a outros fluídos corporais ou amostras de tecidos. Investigações feitas em 4O amostras de sangue bovino mostraram que 37 animais foram positivos para VLB com ELISA, 36 com nested PCR e somente 25 com IDGA. O nested PCR demonstrou uma concordância nos resultados com o ELISA em até 95%. Esses resultados compro varam que o nested PCR pode ser indicado para uma detecção precoce, sensível e direta do VLB em bovinos naturalmente infectados. Comparado com os testes sorológicos, esse método mostra-se mais adequado para a identificação de bovinos infectados possuíndo títulos deanticorpos anti-VLB baixos, transientes ou ausentes. Além disso, esse ensaio pose ser usado para confirmar os resultados sorológicos duvidosos ou a infecção em bovinos assitomáticos. O nested PCR é uma metodologia valiosa para uma rápida investigação epidemiológica do VLB, assim como para a vigilância sanitária da leucose bovino
- Imprenta:
- Source:
- Título do periódico: Arquivos do Instituto Biológico
- ISSN: 0020-3653
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 71, n. 3, p. 303-308, jul./set. 2004
-
ABNT
GREGORY, Lilian et al. Nested polymerase chain reaction validated for sensitive detection of bovine leukemia virus in blood samples from brazilian cattle herds: comparison with conventional Elisa and agar gel immunodiffusion methods. Arquivos do Instituto Biológico, v. 71, n. 3, p. 303-308, 2004Tradução . . Disponível em: http://www.biologico.sp.gov.br/docs/arq/V71_3/gregory1.PDF. Acesso em: 19 maio 2024. -
APA
Gregory, L., Carneiro, P. dos S., Birgel Júnior, E. H., Beier, D., Akamatsu, M. A., Harakava, R., et al. (2004). Nested polymerase chain reaction validated for sensitive detection of bovine leukemia virus in blood samples from brazilian cattle herds: comparison with conventional Elisa and agar gel immunodiffusion methods. Arquivos do Instituto Biológico, 71( 3), 303-308. Recuperado de http://www.biologico.sp.gov.br/docs/arq/V71_3/gregory1.PDF -
NLM
Gregory L, Carneiro P dos S, Birgel Júnior EH, Beier D, Akamatsu MA, Harakava R, Lara M do CC de SH, Pituco EM, Oliveira JCF, Ferreira VCA, Ikuno AA. Nested polymerase chain reaction validated for sensitive detection of bovine leukemia virus in blood samples from brazilian cattle herds: comparison with conventional Elisa and agar gel immunodiffusion methods [Internet]. Arquivos do Instituto Biológico. 2004 ; 71( 3): 303-308.[citado 2024 maio 19 ] Available from: http://www.biologico.sp.gov.br/docs/arq/V71_3/gregory1.PDF -
Vancouver
Gregory L, Carneiro P dos S, Birgel Júnior EH, Beier D, Akamatsu MA, Harakava R, Lara M do CC de SH, Pituco EM, Oliveira JCF, Ferreira VCA, Ikuno AA. Nested polymerase chain reaction validated for sensitive detection of bovine leukemia virus in blood samples from brazilian cattle herds: comparison with conventional Elisa and agar gel immunodiffusion methods [Internet]. Arquivos do Instituto Biológico. 2004 ; 71( 3): 303-308.[citado 2024 maio 19 ] Available from: http://www.biologico.sp.gov.br/docs/arq/V71_3/gregory1.PDF - Caracterização citogenética, histológica e molecular de cultivo primário de células de lesão verrucosa de bovino relacionada ao papilomavírus bovino
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