Construção de vetores para expressão do hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix na levedura Pichia pastoris (2008)
- Authors:
- Autor USP: VICENTE, ELISABETE JOSE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A demanda por produtos da aqüicultura vem crescendo rapidamente, sendo economicamente interessante a aplicação de técnicas modernas de biotecnologia visando o aumento desta fonte de proteína. Neste contexto, já é sabido que a introdução da proteína GH (hormônio de crescimento) ao alimento dos peixes resulta num efeito significante em termos de aumento na taxa de crescimento e produção de massa protéica (PITKANEN et al., 1999; PITKANEN et al., 2001).O objetivo deste trabalho é obtenção de leveduras recombinantes com capacidade de produção de GH, visando sua à aplicação futura como suplemento de ração para crescimento de peixes. Neste sentido, num trabalho anteriormente realizado pelo nosso grupo (PEDRAÇA, 2000), o c-DNA codificador de GH de Hypophthalmichthys molitrix foi clonado no plasmídio pCGH1. Neste trabalho, o c-DNA codificador do GH de H. molitrix foi amplificado por PCR, empregando-se o plasmídio pCGH1 como DNA molde. Este fragmento de DNA foi inserido nos plasmídios pHILD2 (de expressão) e pPIC9K (de expressão e excreção) da levedura Pichia pastoris, gerando os plasmídios pHILGH e pPICGH.O sucesso das construções dos plasmídios recombinantes foi confirmado por seqüenciamento. Foram selecionados dois clones de transformantes de levedura obtidos com o plasmídio recombinante pPICGH, capazes de crescer em até 4mg/ml de G418, indicando a ocorrência de, no mínimo, 7 cópias do plasmídio recombinante integradas no genoma da levedura. A inserção do GH nocromossomo da levedura foi confirmada por reação de PCR, utilizando-se DNA genômico como molde. Na próxima etapa deste trabalho, será analisada a expressão de GH pelos clones recombinantes de levedura.
- Imprenta:
- Publisher: Sociedade Brasileira de Genética
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2008
- Source:
- Título do periódico: Programa
- Conference titles: Congresso Brasileiro de Genética
-
ABNT
MONTEIRO, A. R. S. e VICENTE, Elisabete José e ASTOLFI-FILHO, S. Construção de vetores para expressão do hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix na levedura Pichia pastoris. 2008, Anais.. Ribeirão Preto: Sociedade Brasileira de Genética, 2008. . Acesso em: 01 maio 2024. -
APA
Monteiro, A. R. S., Vicente, E. J., & Astolfi-Filho, S. (2008). Construção de vetores para expressão do hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix na levedura Pichia pastoris. In Programa. Ribeirão Preto: Sociedade Brasileira de Genética. -
NLM
Monteiro ARS, Vicente EJ, Astolfi-Filho S. Construção de vetores para expressão do hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix na levedura Pichia pastoris. Programa. 2008 ;[citado 2024 maio 01 ] -
Vancouver
Monteiro ARS, Vicente EJ, Astolfi-Filho S. Construção de vetores para expressão do hormônio de crescimento da carpa Hypophthalmichthys molitrix na levedura Pichia pastoris. Programa. 2008 ;[citado 2024 maio 01 ] - Clones recombinantes retrotransformantes obtidos em linhagens de leveduras Saccharomyces cerevisiae transformadas com plasmídio bifuncional PGTY-glico
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