Clonagem do gene da bacteriorodopsina na bactéria Cupriavidus necator (2008)
- Authors:
- USP affiliated authors: VICENTE, ELISABETE JOSE - ICB ; SCHENBERG, ANA CLARA GUERRINI - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Os polihidroxialcanoatos (PHAs) são biopolímeros produzidos por diversas bactérias como material de reserva energética. Além de apresentam propriedades termoplásticas comparáveis às dos plásticos de origem petroquímica, são totalmente biodegradáveis. A bactéria Cupriavidus necator DSMZ 545 é uma beta-proteobactéria aeróbica, quimiolitoautotrófica facultativa, considerada modelo para produção de PHA. Objetivos: Visando otimizar a capacidade autotrófica dessa bactéria a estratégia deste trabalho é clonar e expressar o gene da bacteriorodopsina (bop) em C. necator. O gene bop codifica uma proteína de membrana que é capaz de converter energia luminosa em um gradiente de prótons utilizado na formação de ATP. Métodos e Resultados: A fim de obter esta linhagem recombinante, inicialmente procurou-se um promotor que atuasse de forma forte e constitutiva em C. necator. Para tanto, foram testados dois plasmídeos, construídos em nosso laboratório, o pLEGFP e o pBB-panEGFP, contendo respectivamente, o promotor do operon da lactose (plac) e o promotor do gene mrgA de Bacillus subtilis, denominado pan, no comando do gene da proteína verde fluorescente (EGFP). Os resultados mostraram que o promotor pan apresentou alta expressão constitutiva do gene repórter, cuja intensidade foi quantificada através de citometria de fluxo. Posteriormente, o gene bop foi amplificado por PCR, utilizando o DNA genômico de Halobacterium salinarum RI, e clonado em um vetor comercial.) Emseguida, o gene da proteína EGFP presente no plasmídeo pBB-panEGFP foi substituído pelo bop. As próximas etapas do trabalho serão verificar a expressão do bop em C. necator e verificar o comportamento fisiológico da linhagem recombinante. Conclusão: Espera-se conseguir uma linhagem recombinante da bactéria C. necator com características fototróficas. A utilização da bacteriorodopsina para a obtenção de ATP diminuiria a necessidade de substratos para o crescimnento da bactéria e, conseqüentemente, formação de PHAs.
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2008
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
-
ABNT
MARQUEZONI, D. P. et al. Clonagem do gene da bacteriorodopsina na bactéria Cupriavidus necator. 2008, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2008. . Acesso em: 30 abr. 2024. -
APA
Marquezoni, D. P., Gouveia, A. N., Vicente, E. J., & Schenberg, A. C. G. (2008). Clonagem do gene da bacteriorodopsina na bactéria Cupriavidus necator. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Marquezoni DP, Gouveia AN, Vicente EJ, Schenberg ACG. Clonagem do gene da bacteriorodopsina na bactéria Cupriavidus necator. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 30 ] -
Vancouver
Marquezoni DP, Gouveia AN, Vicente EJ, Schenberg ACG. Clonagem do gene da bacteriorodopsina na bactéria Cupriavidus necator. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 30 ] - Isolation of Trypanosoma cruzi dna fragments which function as ars elements in Saccharomyces cerevisiae
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