Ancoragem da Glicoamilase à superfície celular de Saccharomyces cerevisiae (2008)
- Authors:
- Autor USP: VICENTE, ELISABETE JOSE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Inglês
- Abstract: Sistemas do tipo "cell surface display" vêm sendo desenvolvidos para expressão de proteínas heterólogas ancoradas à superfície celular de microrganismos. Várias aplicações deste sistema foram reportadas, incluindo o emprego como biocatalizador celular, desenvolvimento de vacinas e biosorventes celulares. A expressão de proteínas ancoradas à superfície celular de S. cerevisiae oferece mais vantagens do que os sistemas empregando outros microrganismos. Primeiro, S. cerevisiae é um organismo seguro "GRAS" ("Generally Recognized As Safe") empregado há muitos anos na produção de alimentos e fármacos; segundo, é de fácil manipulação genética; e, terceiro a estrutura rígida da célula torna à levedura conveniente para várias das aplicações já mencionadas. Além disso, a levedura pode ser cultivada numa alta densidade celular, em um meio de cultura barato. Neste trabalho foi desenvolvido um sistema que permite ancoragem da proteína glicoamilase de Aspergillus awamori à superfície da parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae. O c-DNA codificador da glicoamilase com sua seqüência sinal de secreção foi fusionado ao fragmento do gene codificador da região C-terminal da proteína Flo1p de S. cerevisiae empregada como âncora. A fusão gênica foi clonada no vetor de expressão de S. cerevisiae pUCC e o fragmento de DNA CG*FC foi empregado na transformação genética das células.) A glicoamilase recombinante foi expressa sobre o controle do promotor da fosfoglicerato quinase(PGK) de S. cerevisiae. Os transformantes de levedura foram capazes de utilizar diretamente o amido como única fonte de carbono e liberar glicose para proliferar. A atividade da glicoamilase não foi detectada no meio de cultura, porém foi detectada no sedimento de células. Conclui-se, portanto, que a atividade da glicoamilase estava associada à fração celular. Estes resultados demonstram que a glicoamilase foi ancorada, com sucesso, à parede celular das células transformantes de levedura.
- Imprenta:
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- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso sobre Diversidade Microbiana da Amazônia
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ABNT
FUENTES RIVERA, J. P. N. e VICENTE, Elisabete José. Ancoragem da Glicoamilase à superfície celular de Saccharomyces cerevisiae. 2008, Anais.. Manaus: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo, 2008. . Acesso em: 01 maio 2024. -
APA
Fuentes Rivera, J. P. N., & Vicente, E. J. (2008). Ancoragem da Glicoamilase à superfície celular de Saccharomyces cerevisiae. In Resumos. Manaus: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. -
NLM
Fuentes Rivera JPN, Vicente EJ. Ancoragem da Glicoamilase à superfície celular de Saccharomyces cerevisiae. Resumos. 2008 ;[citado 2024 maio 01 ] -
Vancouver
Fuentes Rivera JPN, Vicente EJ. Ancoragem da Glicoamilase à superfície celular de Saccharomyces cerevisiae. Resumos. 2008 ;[citado 2024 maio 01 ] - Clones recombinantes retrotransformantes obtidos em linhagens de leveduras Saccharomyces cerevisiae transformadas com plasmídio bifuncional PGTY-glico
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