Investigação dos efeitos de toxinas isoladas das cerdas da lagarta Lonomia obliqua sobre leucócitos, célula endotelial e rede microcirculatória (2008)
- Authors:
- Autor USP: WAISMAM, KALINE - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBC
- Subjects: LEUCÓCITOS (CONTROLE;ESTUDO); ENDOTÉLIO (CONTROLE;ESTUDO); IMUNOTOXINAS; MICROCIRCULAÇÃO; INFLAMAÇÃO (ESTUDO)
- Language: Português
- Abstract: LOPAP (Lonomia obliqua prothrombin activator protease) é uma serino protease isolada das cerdas da Lagarta Lonomia obliqua que induz efeitos sobre a coagulação sangüínea, semelhantes ao extrato de cerdas bruto. Recentemente, foi obtido um peptídeo do LOPAP, P4, que parece possuir efeitos similares à proteína. No sentido de complementar os dados sobre estas toxinas, este estudo investigou os efeitos do LOPAP ou do P4 sobre interações leucócito-endotélio in vivo; expressão de moléculas de adesão, síntese de mediadores inflamatórios, apoptose e necrose de leucócitos e célula endotelial, além de suas possíveis ações sobre a formação de novos vasos. Aplicação tópica de 30´MU´g/mL ou 300´MU´g/mL (10´MU´L) de LOPAP ou de P4 na rede microvascular do mesentério de ratos Wistar machos não alterou o diâmetro de vênulas pós-capilares, as interações dos leucócitos ao endotélio, nem a reatividade microvascular frente à acetilcolina ou noradrenalina. Somente a concentração de 1OOO´MU´g/mL aumentou o número de leucócitos aderidos à parede vascular, simultaneamente a estases intermitentes nos vasos da microcirculação. Ensaios de citometria de fluxo mostraram que a incubação de LOPAP ou P4 (300´MU´g/mL) não modificou a expressão de L-selectina e ´BETA IND.2´-integrina em neutrófilos circulantes obtidos de ratos Wistar. Por outro lado, incubações do LOPAP ou do P4 com célula endotelial (cultura primária obtida do músculo cremaster de ratos Wistar; 300´MU´g/mL)induziram a expressão da molécula ICAM-1, e somente o P4 promoveu a expressão de VCAM-1. Diferentemente, nenhuma das toxinas alterou a expressão de PECAM-1. Ensaios imuinoenzimáticos realizados em sobrenadantes de neutrófilos e de célula endotelial incubadas com LOPAP ou P4 (300´MU´g/mL) mostraram que as toxinas não alteraram a secreção de interleucina-6 (IL-6), interleucina-10 (IL-10), fator de necrose tumoral-'ALFA´ (TNF-'ALFA´) por neutrófilos; as toxinas ) não induziram a secreção de TNF-'ALFA´ pela célula endotelial, mas aumentaram a secreção de IL-6 e IL-10. A concentração de óxido nítrico (NO), quantificado pela reação de Griess, estava aumentada nos sobrenadantes dos dois tipos celulares incubados com LOPAP ou P4. incubação de LOPAP ou P4 com neutrófilos ou célula endotelial não alterou a viabilidade celular, mas preveniu a apoptose da célula endotelial ou neutrófilo provocada pela carência de soro bovino fetal. A incubação simultânea com L-NAME (1 mM) reduziu a proteção conferida pelo LOPAP ou pelo P4. A investigação dos efeitos das toxinas sobre a formação da rede microcirculatória foi realizada em camundongos Swiss, machos, utilizando o modelo da câmara dorsal por microscopia intravital. A aplicação tópica do LOPAP ou P4 (30´MU´g/mL, 300´MU´g/mL; 10´MU´L; 3 doses a cada 96 horas) no leito microvascular dorsal reduziu significantemente o número de vasos na rede microcirculatória em condições basais. Adicionalmente, o tratamento com P4 inibiu aformação de novos vasos provocada pela aplicação tópica de suplemento de fatores de crescimento vascular. O tratamento de célula endotelial de microcirculação de camundongos imortalizadas (tENd) com LOPAP ou P4 (300´MU´g/mL) reduziu a capacidade de migração destas células. Em conjunto, os dados obtidos até o momento mostram que o LOPAP e o P4 não induziram as interações leucócito-endotélio in vivo e que a secreção de mediadores por neutrófilos e célula endotelial, como o NO, podem estar envolvidos com suas atividades anti-apoptótica. Ademais, o LOPAP e o P4 inibem o crescimento de novos vasos, e um dos possíveis mecanismos pode ser a interferência nos mecanismos de migração da célula endotelial
- Imprenta:
- Data da defesa: 18.12.2008
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ABNT
WAISMAM, Kaline. Investigação dos efeitos de toxinas isoladas das cerdas da lagarta Lonomia obliqua sobre leucócitos, célula endotelial e rede microcirculatória. 2008. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2008. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9141/tde-06092017-171829/. Acesso em: 04 maio 2024. -
APA
Waismam, K. (2008). Investigação dos efeitos de toxinas isoladas das cerdas da lagarta Lonomia obliqua sobre leucócitos, célula endotelial e rede microcirculatória (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9141/tde-06092017-171829/ -
NLM
Waismam K. Investigação dos efeitos de toxinas isoladas das cerdas da lagarta Lonomia obliqua sobre leucócitos, célula endotelial e rede microcirculatória [Internet]. 2008 ;[citado 2024 maio 04 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9141/tde-06092017-171829/ -
Vancouver
Waismam K. Investigação dos efeitos de toxinas isoladas das cerdas da lagarta Lonomia obliqua sobre leucócitos, célula endotelial e rede microcirculatória [Internet]. 2008 ;[citado 2024 maio 04 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9141/tde-06092017-171829/
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