Construção de vetores de clonagem para expressão de transportadores de pentoses em S. cerevisiae visando produção de etanol (2009)
- Authors:
- Autor USP: VICENTE, ELISABETE JOSE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Na tentativa de construção de linhagens de leveduras capazes de produzir etanol a partir de hidrolisados de cana-de-açúcar, onde as pentoses são os açúcares presentes em maior concentração, o transporte de pentoses (xilose e arabinose) para dentro da célula vem sendo extensamente estudado, sendo que vários autores concluíram que a captação do açúcar é a etapa limitante para a produção de etanol (Stephanopoulos, 2007). Uma vez que ainda não foi descoberto um sistema específico para o transporte ("uptake") de pentoses, acredita-se que a captação de xilose por leveduras seja mediada de forma não específica pelo sistema de transportadores de hexoses (Hamacher et al., 2002; Hahn-Hägerdal et al., 2007). O objetivo deste trabalho é a construção de cassetes de expressão dos genes HXT5 e HXT7, amplificados por PCR a partir do DNA genômico da linhagem de S.cerevisiae S288C; e a inserção de múltiplas cópias destes cassetes de expressão no genoma de linhagens de S.cerevisiae empregadas em usina sucro-alcooleiras. Neste momento, os genes HXT5 e HXT7 foram anplificados e inseridos, respectivamente, nos vetores comerciais pGEM-T (Vector Systems, Promega) e TOPO (Invitrogen). O sucesso da obtenção destas construções foi confirmado por análises de restrição e sequenciamentos. Na próxima etapa, os genes HXT5 e HXT7 serão clonados no vetor bifuncional pMA91, sob a regulação do promotor e do terminador de transcrição do gene PGK de S. cerevisiae. Em seguida, os fragmentos de DNA contendo oscassetes de expressão PGK-HXT5 e PGK-HXT7 serão purificados e inseridos no vetor pGEM-Teasy-???previamente construído em nosso laboratório (Guerra et al., 2006). Isto permitirá a inserção de múltiplas cópias dos cassetes de expressão desejados no genoma de linhagens S. cerevisiae selvagens
- Imprenta:
- Publisher: Sociedade Brasileira de Microbiologia
- Publisher place: Porto de Galinhas
- Date published: 2009
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso Brasileiro de Microbiologia
-
ABNT
SALES, B. B. e MONTEIRO, A. R. e VICENTE, Elisabete José. Construção de vetores de clonagem para expressão de transportadores de pentoses em S. cerevisiae visando produção de etanol. 2009, Anais.. Porto de Galinhas: Sociedade Brasileira de Microbiologia, 2009. . Acesso em: 01 maio 2024. -
APA
Sales, B. B., Monteiro, A. R., & Vicente, E. J. (2009). Construção de vetores de clonagem para expressão de transportadores de pentoses em S. cerevisiae visando produção de etanol. In Resumos. Porto de Galinhas: Sociedade Brasileira de Microbiologia. -
NLM
Sales BB, Monteiro AR, Vicente EJ. Construção de vetores de clonagem para expressão de transportadores de pentoses em S. cerevisiae visando produção de etanol. Resumos. 2009 ;[citado 2024 maio 01 ] -
Vancouver
Sales BB, Monteiro AR, Vicente EJ. Construção de vetores de clonagem para expressão de transportadores de pentoses em S. cerevisiae visando produção de etanol. Resumos. 2009 ;[citado 2024 maio 01 ] - Clones recombinantes retrotransformantes obtidos em linhagens de leveduras Saccharomyces cerevisiae transformadas com plasmídio bifuncional PGTY-glico
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