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Estudo funcional de microRNAs associados ao carcinoma epidermóide em cultura de células orais (2012)

  • Authors:
  • Autor USP: ANDREGHETTO, FLAVIA MAZIERO - FO
  • Unidade: FO
  • Sigla do Departamento: ODE
  • Subjects: CARCINOMA DE CÉLULAS ESCAMOSAS; NEOPLASIAS BUCAIS; EXPRESSÃO GÊNICA; LINHAGEM CELULAR
  • Keywords: Carcinoma epidermoide oral; MicroRNA; Queratinócitos
  • Language: Português
  • Abstract: Estudos funcionais in vitro são essenciais para a compreensão do papel de miRNAs, pequenas moléculas de RNA que desempenham papel importante na regulação gênica, no câncer. Neste estudo analisamos a viabilidade de linhagens celulares derivadas de carcinoma epidermoide de cabeça e pescoço (CECP), queratinócitos orais provenientes de culturas primárias e queratinócitos imortalizados, como modelos para estudos funcionais de miRNAs previamente identificados como desregulados nesse tipo de carcinoma: miRNA-1, miRNA-7, miRNA-10b e miRNA- 196a. Com este fim avaliamos inicialmente a expressão dos quatro miRNAs em todos os tipos celulares propostos através de reações em cadeia da polimerase em tempo real específicas. As linhagens celulares de carcinoma epidermoide de boca foram previamente caracterizadas quanto ao seu perfil de sequências de DNA do tipo STR (do inglês Short Tandem Repeats ou repetições curtas em sequência) com o objetivo de confirmar a identidade da linhagem. Foram realizados ensaios para a super-expressão e inibição da expressão destas quatro moléculas na linhagem SCC25 e em queratinócitos orais derivados de cultura primária e, uma vez constatado o sucesso da transfecção, avaliamos, para cada caso, a expressão de alvos (mRNAs) validados na literatura. O impacto destas intervenções em proliferação celular, um importante processo desregulado em câncer, também foi avaliado. Os resultados apontam diferenças significativas na expressão dos miRNAs entre linhagens (Continua)(Continuação) celulares passíveis de serem utilizadas como modelos para estudos funcionais em carcinoma epidermoide de cabeça e pescoço. Ressaltam-se diferenças entre linhagens de carcinoma de língua e de faringe, bem como diferenças expressivas entre a linhagem de queratinócitos orais imortalizados e queratinócitos orais normais provenientes de culturas primárias. Conclui-se que cada modelo celular possui características particulares que os tornam mais ou menos adequados para um determinado estudo. A inibição da expressão de genes alvo em função da super-expressão do miRNA regulador foi observada apenas em parte das situações avaliadas. Este resultado decorre do fato que um alvo é regulado por diferentes miRNAs, bem como por diversos outros fatores genéticos e/ou epigenéticos, que podem variar de acordo com modelo estudado. Este resultado ressalta o fato de que seleção cuidadosa das linhagens é fundamental para conclusões precisas em estudos funcionais. A super- expressão de miRNA-10b e miRNA-196a afetou significativamente a progressão do ciclo celular tanto em SCC25 quanto em queratinócitos orais em cultivo, sugerindo um possível papel em CECP relacionado ao controle da proliferação celular
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 14.02.2012
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      ANDREGHETTO, Flavia Maziero. Estudo funcional de microRNAs associados ao carcinoma epidermóide em cultura de células orais. 2012. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2012. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/23/23141/tde-08052012-161313/. Acesso em: 27 maio 2024.
    • APA

      Andreghetto, F. M. (2012). Estudo funcional de microRNAs associados ao carcinoma epidermóide em cultura de células orais (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/23/23141/tde-08052012-161313/
    • NLM

      Andreghetto FM. Estudo funcional de microRNAs associados ao carcinoma epidermóide em cultura de células orais [Internet]. 2012 ;[citado 2024 maio 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/23/23141/tde-08052012-161313/
    • Vancouver

      Andreghetto FM. Estudo funcional de microRNAs associados ao carcinoma epidermóide em cultura de células orais [Internet]. 2012 ;[citado 2024 maio 27 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/23/23141/tde-08052012-161313/


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