Efeito da suplementação com leucina sobre a localização celular e expressão de FOXOs e VPS34 em ratos submetidos à imobilização (2012)
- Authors:
- Autor USP: MORISCOT, ANSELMO SIGARI - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Neste projeto desejamos determinar o envolvimento de FOXO’s na resposta à suplementação de leucina durante a atenuação da atrofia muscular esquelética, além de avaliar a possível relação de FOXO’s com a via de VPS34 e VPS15, já que estas estão ligadas ao papel ativador de leucina em vias anabólicas como mTOR. Ratos Wistar (~4 meses e 250g) foram divididos em quatro grupos de quatro animais cada, designados como, Controle (Ctr), Imobilizados (Imob), tratados apenas com leucina (Leu) e imobilizados tratados com leucina (Imob+Leu), submetidos a diferentes períodos de tratamento: 6h, 12h, 24h e 3 dias; os animais suplementados receberam cerca de 2,7mg/kg corporal diariamente. Os animais foram sacrificados e os músculos soleos extraídos. Foram realizados western blot e imunofluorescências para FOXO (FOXO1-fosforilado e total, FOXO3a-fosforilado e total), VPS34 e 15. Os procedimentos e protocolos experimentais foram aprovados pela Comissão de ética no uso de animais, CEUA-ICB/USP n°151. Os western blots para FOXOs e VPS 34 e 15 na curva de tempo de imobilização de 6h a 3 dias em relação ao grupo controle(100%), mostram que FOXO1-fosforilado se mantém relativamente constante após 6h, 12h e 1dia de imobilização(~97%)enquanto FOXO1-total aumenta sua expressão(~164%) durante este período. Porém após 3 dias ambos parecem diminuir para níveis próximos ao controle(~113%). FOXO3a-total e fosforilado seguem o mesmo padrão de FOXO1. VPS34 e 15, apresentaram padrões semelhantes à FOXO1 e 3 totais (respectivamente ~154% e 153%). Western blot de animais Imob+Leu 1 e 3 dias mostram uma redução de FOXO1-fosforilado em comparação aos controles(~70%); FOXO3-total e fosforilado diminuem suas expressões em 3 dias para níveis semelhantes aos somente imobilizados(~109%); VPS34 parece manter-se igual ao controle em 1 dia de imobilização com leucina(~98%)%) mas aumenta em 3 dias(~130%), enquanto VPS15 diminui em 1 dia(~80%) e é semelhante ao controle em 3dias(~94%). No tratamento de animais apenas com leucina não ocorreram alterações significativas em comparação ao controle(~98%). Imunofluorescências mostraram que FOXO’s e VPS34 possuem marcação nuclear após 1 dia de imobilização, diferentemente de VPS15 que parece não ser modulado pela imobilização ou tratamentos com leucina. Interessantemente, animais imobilizados e suplementados com leucina não apresentaram marcação nuclear destas proteínas. VPS34 possuem marcação nuclear após 1 dia de imobilização, diferentemente de VPS15 que parece não ser modulado pela imobilização ou tratamentos com leucina. Interessantemente, animais imobilizados e suplementados com leucina não apresentaram marcação nuclear destas proteínas. VPS34 possuem marcação nuclear após 1 dia de imobilização, diferentemente de VPS15 que parece não ser modulado pela imobilização ou tratamentos com leucina. Interessantemente, animais imobilizados e suplementados com leucina não apresentaram marcação nuclear destas proteínas. Nota-se que os FOXOs, VPS 34 e 15 parecem estar sendo modulados de maneira muito semelhante, no inicio do processo atrófico o que pode sugerir uma interação entre essas proteínas durante esta sinalização. A suplementação com leucina foi capaz de alterar a localização de FOXO3a e VPS34 durante o processo atrófico, sugerindo que o impedimento de translocação destas moléculas para o núcleo são cruciais para a atenuação da atrofia muscular.
- Imprenta:
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental (FeSBE)
-
ABNT
SILVA, W. J. e BAPTISTA, I. L. e MORISCOT, Anselmo Sigari. Efeito da suplementação com leucina sobre a localização celular e expressão de FOXOs e VPS34 em ratos submetidos à imobilização. 2012, Anais.. São Paulo: FeSBE, 2012. . Acesso em: 21 maio 2024. -
APA
Silva, W. J., Baptista, I. L., & Moriscot, A. S. (2012). Efeito da suplementação com leucina sobre a localização celular e expressão de FOXOs e VPS34 em ratos submetidos à imobilização. In Resumos. São Paulo: FeSBE. -
NLM
Silva WJ, Baptista IL, Moriscot AS. Efeito da suplementação com leucina sobre a localização celular e expressão de FOXOs e VPS34 em ratos submetidos à imobilização. Resumos. 2012 ;[citado 2024 maio 21 ] -
Vancouver
Silva WJ, Baptista IL, Moriscot AS. Efeito da suplementação com leucina sobre a localização celular e expressão de FOXOs e VPS34 em ratos submetidos à imobilização. Resumos. 2012 ;[citado 2024 maio 21 ] - Effect creatine supplementation upon skeletal muscle wasting during immobilazation
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