Regulação da expressão da HLA-G: papel de sítios polimórficos observados na região 3' não traduzida do gene (2012)
- Authors:
- Autor USP: PALOMINO, GUSTAVO MARTELLI - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: POLIMORFISMO; SEQUENCIAMENTO GENÉTICO; EXPRESSÃO GÊNICA
- Language: Português
- Abstract: HLA-G é uma molécula de histocompatililidadede classe I não-clássica, descrita primeiramente na placenta, responsável pela tolerância materno fetal. Além da placenta, HLA-G pode ser expresso em contexto patológico, com frequências variáveis, desempenhando papel benéfico (transplantes e doença autoimune) ou papel maléfico (câncer e infecções). O gene HLA-G, diferentemente de outros genes HLA, apresenta baixa frequência de polimorfismos na região codificadora, mas grande variabilidade genética nas regiões reguladoras do gene, ou seja, a 5' e a 3' não traduzida (3'NT) do gene. Pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos na regulação do gene HLA-G, entretanto, sabe-se que a região 3' NT desempenha papel importante na regulação pós-transcricional devido à ligação a microRNAs específicos (+3142C/G) ou modificação da estabilidade do RNAm (Inserção/Deleção de 14 pares de base e +3187A/G). Além desses, outros sítios descritas nessa região ainda não foram estudados em relação à expressão de HLA-G. Neste estudo, realizamos a tipificação dos haplótipos da região 3'NT do HLA-G em indivíduos saudáveis (153 brasileiros e 189 franceses), associando-os com os níveis plasmáticos da molécula HLA-G. Em adição, clonamos os sítios da região 3'NT, mais frequentemente encontrados nessas duas populações, em plasmídeo, contendo o gene repórter luciferase (pMIR-REPORT). Logo após, transfectamo-os em células de experimentação que expressam (FON+/melanoma e JEG-3/corioncarcinoma) ou não (M8/ melanoma e U251/glioblastoma). Os níveis de expressão do gene repórter foram dosados. Todas essas análises permitiram-nos mostrar por um lado que houve diferença significativa nas frequências alélicas e genotípicas de polimorfïsmos na região 3' NT entre populações brasileiras e francesas. Entretanto identificamos diferença significativa na frequência de haplótipos entre as populaçõesbrasileira e francesa (P=0.0298±0.0075).Considerando as duas populações juntas, os indivíduos que apresentaram o genótipo Deleção/Deleção e Deleção/Inserção para os 14 pares de base apresentaram níveis elevados de HLA-G solúvel em relação aos indivíduos homozigotos Inserção/Inserção para os 14 pares de base (P=0,018). Indivíduos que apresentam o genótipo +3027C/C ou +3027A/C apresentaram níveis de HLA-G solúvel mais elevados em relação aos indivíduos +3027A/A. Indivíduos que apresentam o genótipo +3035C/C ou +3035C/T apresentaram níveis de HLA-G mais elevados em relação os indivíduos +3035T/T (P<0,0001). Estratificando os indivíduos em relação aos haplótipos da região 3'NT, verificamos que os haplótipos UTR-1, UTR-2, UTR-3, UTR-4 e UTR-6 foram associados com alta expressão de HLA-G, enquanto os haplótipos UTR-5 e UTR-7, com baixa expressão. Além disso, os resultados funcionais in vitro demonstraram uma maior modulação da expressão de luciferase (diminuição) nos haplótipos UTR-5 e UTR-7 que contém o alelo 14 pb em relação aos outros alelos que não apresentam a sequencia de 14 pb sugerindo atividade de microRNAs que se ligam a essa região. A exceção foi com a UTR-2 que contem a sequência de 14 pb mais foi associada a alta expressão de HLA-G, os resultados in vivo estão de acordo com os resultados in nitro. Os outros alelos presentes no haplótipo UTR-2 poderia contrabalancear o efeito dos da sequencia 14 pb. Uma vez que a molécula tenha papel imunoregulador na resposta imune, a definição de sítios polimórficos associados aos seus níveis de expressão com consequências maléficas ou benéficas aos pacientes é de fundamental importância para o estabelecimento de novas terapias
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2012
- Data da defesa: 14.11.2012
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ABNT
PALOMINO, Gustavo Martelli. Regulação da expressão da HLA-G: papel de sítios polimórficos observados na região 3' não traduzida do gene. 2012. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2012. . Acesso em: 21 maio 2024. -
APA
Palomino, G. M. (2012). Regulação da expressão da HLA-G: papel de sítios polimórficos observados na região 3' não traduzida do gene (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Palomino GM. Regulação da expressão da HLA-G: papel de sítios polimórficos observados na região 3' não traduzida do gene. 2012 ;[citado 2024 maio 21 ] -
Vancouver
Palomino GM. Regulação da expressão da HLA-G: papel de sítios polimórficos observados na região 3' não traduzida do gene. 2012 ;[citado 2024 maio 21 ]
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