Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas (2013)
- Authors:
- Autor USP: ALVES, RAFAEL FERRAZ - EP
- Unidade: EP
- Sigla do Departamento: PQI
- Subjects: VETORES (DESENVOLVIMENTO;CARACTERÍSTICAS); PROTEÍNAS; LIPOSSOMOS
- Language: Português
- Abstract: Um dos principais limitantes para o desenvolvimento de protocolos eficientes de terapia gênica e vacinação com DNA provém da baixa eficiência de transferência gênica por parte dos vetores não-virais. Isso surge, principalmente, pela dificuldade de transporte de DNA estrangeiro do exterior para o núcleo das células alvo, devido à presença de inúmeras barreiras físicas, enzimáticas e difusionais. O principal objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento, caracterização e avaliação de novos vetores não virais, formados por proteínas e lipídeos, capazes de realizar eficientemente a entrega de material genético (DNA plasmidial, pDNA) ao núcleo de células de mamífero. Para esse fim, complexos binários (CBs) foram formados combinando-se pDNA à protamina ou à proteína recombinante TRP3. Foi também estudado o encapsulamento destes CBs em lipossomas catiônicos, formados pelos lipídios EPC:DOPE:DOTAP, gerando então complexos pseudo-ternários (CPTs). Os estudos de tamanho de partícula e potencial zeta indicaram que ambas as proteínas são capazes de condensar pDNA e formar complexos (CBs e CPTs) pequenos (~100 nm) e de carga superficial positiva (+11,9 mV a +36,8 mV), adequados para a transfecção. No entanto, foram os CPTs contendo TRP3 que obtiveram os níveis mais elevados de transfecção (25,3%). Os ensaios de citotoxicidade mostraram que os CBs afetaram pouco a viabilidade celular, enquanto citotoxicidades mais elevadas foram observadas com o uso de CPTs. Finalmente, os resultados indicam que a TRP3 associada ao lipossoma (CPTs) aumenta a eficiência de entrega devido à alteração do tráfego intracelular, sugerindo um efeito sinérgico entre as diferentes moléculas do vetor na superação das várias barreiras encontradas no interior da célula.
- Imprenta:
- Data da defesa: 24.10.2013
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ABNT
ALVES, Rafael Ferraz. Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas. 2013. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2013. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/. Acesso em: 21 maio 2024. -
APA
Alves, R. F. (2013). Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/ -
NLM
Alves RF. Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas [Internet]. 2013 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/ -
Vancouver
Alves RF. Desenvolvimento e caracterização de vetores não virais para entrega gênica baseados em proteínas e lipossomas [Internet]. 2013 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/3/3137/tde-21102014-092645/
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