Extração do DNA de amostras de biofilme subgengival de pacientes portadores de Periodontite Agressiva (2014)
- Authors:
- Autor USP: SARAIVA, LUCIANA - FO
- Unidade: FO
- Subjects: DNA; BIOFILMES; PERIODONTITE AGRESSIVA
- Language: Português
- Abstract: Introdução: a Periodontite Agressiva (PA) é um tipo de periodontite bastante característico. Ocorre em indivíduos jovens e é caracterizada por perda óssea e de inserção relativamente rápida. Estudos demonstram que o Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) está implicado como o maior patógeno desta doença. Espécies bacterianas como P. gingivalis (Pg), T. forsythia (Tf), T. denticola, C. gracilis, E. nodatum e P. intermedia parecem também desempenhar um papel fundamental na progressão da doença. Objetivos: extração de DNA das amostras subgengivais de pacientes portadores de PA, para identificação e quantificação dos patógenos periodontais Aa, Pg e Tf pela técnica de qPCR em tempo real. Materiais e métodos: foram coletadas amostras subgengivais de 4 sítios de 39 pacientes portadores de PA, com cones de papel estéreis introduzidos na bolsa periodontal. Estas amostras foram imediatamente colocadas em solução de Tris-‐EDTA, vortexadas e congeladas a -‐80˚C. O DNA das amostras foi extraído com o kit Qiamp DNA Mini kit® (Qiagen) seguindo instruções do fabricante. Após a extração, o DNA foi quantificado no espectrofotômetro (Nanodrop™). O material foi armazenado a -‐20º. Resultados: foram obtidos valores numéricos da quantidade de DNA presente em cada amostra, através do espectrofotômetro. Exemplo dos valores obtidos para cinco pacientes: P1 sítios 17; 27; 36; 43 valores 5,8; 3,5; 2,9; 3,9 respectivamente; P3 sítios 12; 23; 34; 47 valores 4,9; 5,3; 5,0; 19,5; P4 sítios 14; 23; 34; 43 valores 6,7; 12,9; 12,0; 4,2; P5 sítios 16; 22; 31; 44 valores 4,0; 4,0; 3,3; 3,7; P6 sítios 11; 26; 36; 41 valores 5,3; 8,2; 4,9; 5,9. Conclusão: a quantidade de material obtido varia muito entre os diferentes sítios às vezes, do mesmo paciente. (Continuar)(Continuação)Em alguns sítios o valor foi negativo, o que significa que não havia DNA suficiente para ser detectado. Por isso, verificamos a necessidade de estabelecer um novo protocolo para otimizar a extração a partir de kits comerciais disponíveis
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- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Reunião de Pesquisa e do XVIII Seminário de Iniciação Científica da Faculdade de Odontologia da USP
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ABNT
BISPO, T. A. A. e MAYER, Marcia Pinto Alves e SARAIVA, Luciana. Extração do DNA de amostras de biofilme subgengival de pacientes portadores de Periodontite Agressiva. 2014, Anais.. São Paulo: Faculdade de Odontologia, Universidade de São Paulo, 2014. Disponível em: http://www.fo.usp.br/pesquisa/wp-content/uploads/Aprovados_Iniciacao_Cientifica_XXI_ReuniaoPesquisa.pdf. Acesso em: 30 abr. 2024. -
APA
Bispo, T. A. A., Mayer, M. P. A., & Saraiva, L. (2014). Extração do DNA de amostras de biofilme subgengival de pacientes portadores de Periodontite Agressiva. In Resumos. São Paulo: Faculdade de Odontologia, Universidade de São Paulo. Recuperado de http://www.fo.usp.br/pesquisa/wp-content/uploads/Aprovados_Iniciacao_Cientifica_XXI_ReuniaoPesquisa.pdf -
NLM
Bispo TAA, Mayer MPA, Saraiva L. Extração do DNA de amostras de biofilme subgengival de pacientes portadores de Periodontite Agressiva [Internet]. Resumos. 2014 ;[citado 2024 abr. 30 ] Available from: http://www.fo.usp.br/pesquisa/wp-content/uploads/Aprovados_Iniciacao_Cientifica_XXI_ReuniaoPesquisa.pdf -
Vancouver
Bispo TAA, Mayer MPA, Saraiva L. Extração do DNA de amostras de biofilme subgengival de pacientes portadores de Periodontite Agressiva [Internet]. Resumos. 2014 ;[citado 2024 abr. 30 ] Available from: http://www.fo.usp.br/pesquisa/wp-content/uploads/Aprovados_Iniciacao_Cientifica_XXI_ReuniaoPesquisa.pdf - Análise do polimorfismo no gene SLC1A3 em pacientes com periodontite e pacientes controle
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