Busca de micrornas reguladores da expressão de MuRFs durante o processo regenerativo muscular esquelético (2014)
- Authors:
- USP affiliated authors: YAN, CHAO YUN IRENE - ICB ; MORISCOT, ANSELMO SIGARI - ICB
- Unidade: ICB
- Subjects: BIOLOGIA CELULAR E DO DESENVOLVIMENTO; REGULAÇÃO GÊNICA; EXPRESSÃO GÊNICA; ANATOMIA; MÚSCULOS (REGENERAÇÃO)
- Language: Português
- Abstract: Introdução: A capacidade regenerativa do tecido muscular esquelético é de fundamental importância para o reparo de grandes lesões e também microlesões decorrentes, por exemplo, de atividades cotidianas. Ao explorar o processo de regeneração nosso grupo de pesquisa demonstrou que as E3 ligases MuRF1 e MuRF2, além de estarem implicadas ao processo de atrofia é também fundamental para a regeneração muscular (dados não publicados). A fim de explorar os mecanismos moleculares envolvidos no aumento da expressão dos MuRFs durante a regeneração, criamos a hipótese de que certos microRNAs (ou miRs, reguladores da expressão gênica a nível pós-transcricional) podem estar envolvidos Objetivos: Investigar a expressão de miRs que tem como alvo MuRF1 e MuRF2, e avaliar seu impacto para o processo de regeneração muscular esquelética. Metodos: Camundongos C57/BL6 (~8sem. 30±3g) foram induzidos à lesão muscular com Cardiotoxina (10μM) injetada no músculo tibial anterior, exposto cirurgicamente. Posteriormente divididos em grupos por períodos de recuperação (1, 3, 10 e 21dias; n=4), ou injetados com solução salina 0,9% (Control, n=4). Após estes períodos, foram sacrificados e tiveram o músculo removido e analisado em PCR-Real time e Western blot. Os vetores pMiR-MuRF1 ou 2, foram produzidos a partir da amplificação da 3’UTR do cDNA de cada MuRF e clonados dowstream do gene da luciferase do vetor pMiR-Report system. Os vetores(300ng) foram co-transfectados com o determinado miR (miRs mimics 40uM) em células HeLa. A expressão relativa da luciferase foi normalizada pela β-Galactosidase. Analise estatística utilizando One-way ANOVA; turkey post test; p<0,05 vs Control ou Negative Control#1)Resultados: MuRF1 eleva sua expressão protéica após 3 e 10 dias da lesão (~100%;p<0,05 vs Control), enquanto sua expressão gênica se eleva apenas em 1dia (~100%;p<0,05 vs Control), por outro lado a expressão gênica de MuRF2 se eleva tardiamente, 10 dias após a lesão (~50%;p<0,05 vs Control). Os miRs 29c e 101a que tem MuRF1 como alvo teórico (in silico) e miRs 133a e 133b que tem MuRF2 como alvo teórico (in silico) são reprimidos em 1 e 3 dias (redução de ~50-80%;p<0,05 vs Control). O ensaio de luciferase utilizando os vetores com a 3’UTR de cada MuRF, demonstra que na presença do miR29c mimic co-transfectado com o vetor pMiR-MuRF1 a expressão relativa da luciferase é reduzida (redução de ~80%;p<0,05 vs Negative Control#1), por outro lado o miR101a mimic não teve qualquer efeito. O ensaio com o vetor pMiR-MuRF2 reduziu a luciferase para ambos os miRs 133a e 133b (redução de ~80%;p<0,05 vs Negative Control#1). Conclusão: Estes resultados parciais demonstram que os miRs 29c, 133a e 133b tem um importante papel na regulação da expressão gênica dos MuRFs
- Imprenta:
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental (FeSBE)
-
ABNT
SILVA, W. J. et al. Busca de micrornas reguladores da expressão de MuRFs durante o processo regenerativo muscular esquelético. 2014, Anais.. Caxambu: FeSBE, 2014. . Acesso em: 03 maio 2024. -
APA
Silva, W. J., Baptista, I. L., Silvestre, J. G. O., Ramos, G. V., Yan, C. Y. I., & Moriscot, A. S. (2014). Busca de micrornas reguladores da expressão de MuRFs durante o processo regenerativo muscular esquelético. In Resumos. Caxambu: FeSBE. -
NLM
Silva WJ, Baptista IL, Silvestre JGO, Ramos GV, Yan CYI, Moriscot AS. Busca de micrornas reguladores da expressão de MuRFs durante o processo regenerativo muscular esquelético. Resumos. 2014 ;[citado 2024 maio 03 ] -
Vancouver
Silva WJ, Baptista IL, Silvestre JGO, Ramos GV, Yan CYI, Moriscot AS. Busca de micrornas reguladores da expressão de MuRFs durante o processo regenerativo muscular esquelético. Resumos. 2014 ;[citado 2024 maio 03 ] - Spatio-temporal expression of connexins 36, 43 and 45 in developing mouse retina
- Biologia celular de células da crista neural durante o desenvolvimento de embriões de galinha
- Slug e Snail são expressos em populações distintas de células da crista neural de Gallus gallus
- Expressão gênica exógena em embriões de galinha por eletroporação in ovo
- Retinoic acid and the evolutionary origin of cardiac chambers
- 40LoVe and Samba are involved in Xenopus Neural Development and Functionally Distinct from hnRNP AB
- Morfogênese embrionária e diferenciação pós-mitótica no sistema nervoso
- F6, a novel gene that affects dorsal-ventral axis formation in embryogenesis
- A detailed description of an economical setup for electroporation of chick embryos in ovo
- Chicken scratch2 is expressed during early embryonic neurogenesis
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
