Clonagem, expressão, purificação e caracterização estrutural da região AP-1 da oncoproteína Jun (2014)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, FLAVIO SOUSA - IPEN
- Unidade: IPEN
- Subjects: PROTEÍNAS; NEOPLASIAS; INIBIDORES DE ENZIMAS; ESPECTROMETRIA DE MASSAS
- Language: Português
- Abstract: A proteína jun é um dos principais integrantes do complexo AP-1 e está envolvido nos processos inflamatórios, diferenciação, apoptose e migração celular. Esta proteína pode formar homodímeros e heterodímeros por meio da dimerização que ocorre pelo sítio de sequências de leucinas. Existem evidências de que a proteína jun pode ser inibida pela proteína RPL10 mediante a ligação destas proteínas, no mesmo sítio de sequências de leucinas no núcleo celular, parando a progressão de tumores. O objetivo deste trabalho foi expressar, isolar e caracterizar a região de ligação das sequências de leucinas (região AP-1), para estudos posteriores de ligação com a proteína RPL10. O cDNA para proteína jun foi amplificado por PCR e clonado nos vetores de expressão pET 26b(+), pET 28a-c(+) e p1813 e expressa em E.coli BL21 (DE3). A proteína expressa em vetor pET28_AP1 foi eficientemente purificada pela técnica de cromatografia de afinidade a íons metálicos, por possuir uma sequência (poli)histidina que facilitou a purificação, apresentando um excelente grau de pureza. A identidade da proteína foi confirmada através de análise feita por western blotting e dot blotting e também por analise por espectrometria de massas
- Imprenta:
- Data da defesa: 25.06.2014
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ABNT
SILVA, Flavio Sousa. Clonagem, expressão, purificação e caracterização estrutural da região AP-1 da oncoproteína Jun. 2014. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-18092014-091537/. Acesso em: 21 maio 2024. -
APA
Silva, F. S. (2014). Clonagem, expressão, purificação e caracterização estrutural da região AP-1 da oncoproteína Jun (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-18092014-091537/ -
NLM
Silva FS. Clonagem, expressão, purificação e caracterização estrutural da região AP-1 da oncoproteína Jun [Internet]. 2014 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-18092014-091537/ -
Vancouver
Silva FS. Clonagem, expressão, purificação e caracterização estrutural da região AP-1 da oncoproteína Jun [Internet]. 2014 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-18092014-091537/
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