Regulação da expressão do transportador de aminoácidos de Leishmania (Leishmania) amazonensis (2014)
- Authors:
- Autor USP: SALES, MARIA CARMEN OLIVEIRA PINHO DE - IMT
- Unidade: IMT
- Subjects: LEISHMANIA; PROTEÍNAS DE TRANSPORTE; ARGININA; EFEITOS DA TEMPERATURA
- Language: Português
- Abstract: Leishmania caracteriza-se por apresentar duas formas morfologicamente distintas em seu ciclo de vida: promastigotas e amastigotas. As formas promastigotas vivem tubo digestório do vetor flebotomíneo, sob as condições de pH 7,0 e temperatura ambiente, ao redor de 25ºC. As formas amastigotas são encontradas no interior dos fagolisossomos de macrófagos infectados onde encontram um ambiente de pH ácido e temperatura ao redor de 34ºC. Leishmania utiliza arginina para a síntese de poliaminas, que desempenham papel fundamental no crescimento, diferenciação celular e sucesso da infecção. A tomada de arginina em L. (L.) amazonensis é feita pela proteína transportadora de aminoácidos – amino acid transporter-like 3 (AAP3), codificada por duas cópias do gene (5.1 aap3 e 4.7 aap3) dispostas em tandem no genoma. Os transcritos de 5.1 aap3 e de 4.7 aap3 apresentam 98% de identidade entre as ORFs, mas diferem nas 5’ e 3’ UTR. O objetivo do presente trabalho foi avaliar se os sinais de temperatura, pH e privação de arginina disparam a regulação da expressão de aap3 em formas promastigotas e amastigotas. Para isso avaliamos o nível dos transcritos e realizamos ensaios de tomada de arginina em células submetidas à privação ou suplementadas com arginina, nas temperaturas de 25°C ou 34°C em pH 7,0 ou 5,0. Constatou-se em formas promastigotas que o transcrito 5.1 aap3 apresentou maior abundância em relação a 4.7 aap3, e que a privação promoveu o aumento da tomada do aminoácido quando os parasitos eram mantidos em pH 7,0 a 25°C, corroborando dados anteriores do nosso grupo. Demonstramos que a mudança de temperatura foi um fator importante para o aumento do número de cópias de 5.1 aap3 em promastigotas privadas, principalmente quando associadas com o pH 5,0.Além disso, o aumento da temperatura favoreceu a tomada de arginina, corroborando com a elevação do número de cópias observada para o transcrito 5.1 aap3. Em amastigotas-like, mantidas a 25°C e pH 7,0 a privação reverteu a expressão de 5.1 aap3 para o mesmo perfil observado para promastigotas. Contudo, não observamos um favorecimento na tomada de arginina. Ainda em amastigotas, o tratamento a 34°C e pH 7,0 favoreceu a tomada de arginina, porém não observamos um aumento correspondente na quantificação do transcrito. O transcrito 4.7 aap3 não apresentou alteração significativa em qualquer tratamento em promastigotas e amastigotas. Os nossos resultados indicam que a variação de temperatura e do pH, além da privação de arginina, podem ser sinais importantes para regulação da expressão diferencial de aap3, principalmente a cópia 5.1 aap3, de forma a assegurar a oferta de arginina em formas promastigotas previamente à entrada no hospedeiro mamífero e em formas amastigotas, na passagem para o vetor, assegurando o sucesso da infecção.
- Imprenta:
- Data da defesa: 17.11.2014
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ABNT
SALES, Maria Cármen Oliveira Pinho de. Regulação da expressão do transportador de aminoácidos de Leishmania (Leishmania) amazonensis. 2014. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014. . Acesso em: 30 abr. 2024. -
APA
Sales, M. C. O. P. de. (2014). Regulação da expressão do transportador de aminoácidos de Leishmania (Leishmania) amazonensis (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Sales MCOP de. Regulação da expressão do transportador de aminoácidos de Leishmania (Leishmania) amazonensis. 2014 ;[citado 2024 abr. 30 ] -
Vancouver
Sales MCOP de. Regulação da expressão do transportador de aminoácidos de Leishmania (Leishmania) amazonensis. 2014 ;[citado 2024 abr. 30 ]
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