Expressão da glicoproteína rábica utilizando pseudopartículas virais (2015)
- Authors:
- Autor USP: BERNARDINO, THAISSA CONSONI - BIOTECNOLOGIA
- Unidade: BIOTECNOLOGIA
- Subjects: VACINAS VIRAIS; RAIVA; GLICOPROTEINAS DA MEMBRANA; REAÇÂO EM CADEIA POR POLIMERASE; WESTERN BLOTTING
- Keywords: Glicoproteína do vírus da raiva; Pseudopartículas virais; Rabies vaccine; Rabies virus glycoprotein; RT-PCR quantitativa; RT-PCR quantitative; Vacina contra raiva; Virus pseudoparticles
- Language: Português
- Abstract: Este estudo buscou estabelecer um sistema de produção de pps, contendo a proteína Gag do MLV para formação da cápside, as glicoproteínas de membrana E1 e E2 do HCV carregando o RNA da glicoproteína do vírus da raiva - RVGP (ppHCV-RVGP). Para gerar ppHCV-RVGP, células HEK293-T foram co-transfectadas com 3 vetores, utilizando lipofectamina e eletroporação. As ppHCV-RVGP foram coletadas do sobrenadante 48 h p.t e quantificadas por qRT-PCR foram obtidas 300 cópias de RNA/μL, para ambos os métodos de co-transfecção. Células Huh 7 foram infectadas e a expressão da RVGP foi analisada 48 h p.i. por ELISA e imunofluorescência indireta (IFI). Estes imunoensaios mostraram a baixa expressão da proteína RVGP. Realizamos ensaios de qRT-PCR para detectar a adesão e entrada da ppHCV-RVGP e verificou-se que a estas foram ineficientes. Realizamos western blotting para analisar a expressão das proteínas necessárias para a formação das ppHCV, este mostrou a produção da proteína Gag e a incorporação das proteínas de membrana, porém a glicoproteína E2 não foi incorporada eficientemente na membrana da ppHCV. Concluímos que o sistema de pseudopartículas virais foi eficiente para transportar o RNA-RVGP, porém não foi capaz de infectar eficientemente células Huh 7
- Imprenta:
- Data da defesa: 27.05.2015
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ABNT
BERNARDINO, Thaissa Consoni. Expressão da glicoproteína rábica utilizando pseudopartículas virais. 2015. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2015. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-04092015-150538/. Acesso em: 11 maio 2024. -
APA
Bernardino, T. C. (2015). Expressão da glicoproteína rábica utilizando pseudopartículas virais (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-04092015-150538/ -
NLM
Bernardino TC. Expressão da glicoproteína rábica utilizando pseudopartículas virais [Internet]. 2015 ;[citado 2024 maio 11 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-04092015-150538/ -
Vancouver
Bernardino TC. Expressão da glicoproteína rábica utilizando pseudopartículas virais [Internet]. 2015 ;[citado 2024 maio 11 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-04092015-150538/
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