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Obtenção, caractetizações estruturais e atividade enzimática do sítio C-catalítico da enzima conversora de angiotensina I - região ALA<sup>959</sup> até SER<sup>1066</sup> (2015)

  • Authors:
  • Autor USP: ELIAS, CAROLINE CRISTINA - IPEN
  • Unidade: IPEN
  • Subjects: HIPERTENSÃO; CIRCULAÇÃO SANGUÍNEA; ENZIMAS; BIOLOGIA MOLECULAR
  • Language: Português
  • Abstract: A enzima conversora de angiotensina (ECA) catalisa a conversão de angiotensina I (Ang I) no vasoconstritor angiotensina II (Ang II) e hidrolisa a bradicinina (BK). ECA somática (sECA) possui dois domínios homólogos (N e C) que têm 60% de identidade. Embora estas duas regiões tenham homologia grande, o sítio catalítico C-domínio exibe uma atividade três vezes maior do que o N-domínio na hidrolise de Ang I in vivo. Este fato torna interessante o desenvolvimento de novos estudos de inibidores ou a melhoria dos já existentes. O objetivo deste estudo foi obter a região Ala959 até Ser1066 do Cdomínio da sECA (c-sECA), em uma estrutura conformacional semelhante à estrutura nativa. Nós amplificamos a sequência correspondente ao sítio catalítico da c-sECA com 324pb e clonamos esta sequência no vetor pET 28a(+). O segmento (nomeado de pET28_c-sECA) foi expresso em sistema bacteriano. A proteína foi expressa na forma solúvel e a purificação foi feita em uma única etapa utilizando a coluna de afinidade His-tag, a qual produziu a proteína pura. Análises estruturais por dicroísmo circular e fluorescência confirmaram que a proteína recombinante estava na conformação correta, e os ensaios de atividade mostraram que a c-sECA possui atividade enzimática e é inibida por lisinopril
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 25.09.2015
  • Acesso à fonte
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    • ABNT

      ELIAS, Caroline Cristina. Obtenção, caractetizações estruturais e atividade enzimática do sítio C-catalítico da enzima conversora de angiotensina I - região ALA<sup>959</sup> até SER<sup>1066</sup>. 2015. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2015. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-23112015-083845/. Acesso em: 21 maio 2024.
    • APA

      Elias, C. C. (2015). Obtenção, caractetizações estruturais e atividade enzimática do sítio C-catalítico da enzima conversora de angiotensina I - região ALA<sup>959</sup> até SER<sup>1066</sup> (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-23112015-083845/
    • NLM

      Elias CC. Obtenção, caractetizações estruturais e atividade enzimática do sítio C-catalítico da enzima conversora de angiotensina I - região ALA<sup>959</sup> até SER<sup>1066</sup> [Internet]. 2015 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-23112015-083845/
    • Vancouver

      Elias CC. Obtenção, caractetizações estruturais e atividade enzimática do sítio C-catalítico da enzima conversora de angiotensina I - região ALA<sup>959</sup> até SER<sup>1066</sup> [Internet]. 2015 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/85/85131/tde-23112015-083845/


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