Monofosforil lipídeo A e diidrolipoil desidrogenase deParacoccidioides brasiliensis têm efeito terapêutico na paracoccidiodomicose experimental (2016)
- Authors:
- Autor USP: LANDGRAF, TAISE NATALI - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: PARACOCCIDIOIDOMICOSE; PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS; IMUNOTERAPIA; ADJUVANTES IMUNOLÓGICOS
- Keywords: Antígenos; Antigens; Dihydrolipoyl dehydrogenase; Diidrolipoil desidrogenase; Immunotherapy; Adjuvants; Monofosforil lipídeo A; Monophosphoryl lipid A; Paracoccidioidomycosis
- Language: Português
- Abstract: Paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada por fungos dimórficos do gênero Paracoccidioides - P. brasiliensis ou P. lutzii. A alta incidência da PCM no Brasil, somada à gravidade que o quadro clínico pode assumir e ainda à ausência de um antifúngico de baixa toxicidade para tratamento de curta duração, motivaram a avaliação de adjuvantes e caracterização dos componentes antigênicos de P. brasiliensis em um modelo imunoterapêutico de PCM. Assim, inicialmente, avaliou-se o efeito de monofosforil lipídeo A (MPLA) de Salmonella minnesota, PAM3CSK4, hidróxido de alumínio e AS04 em camundongos cronicamente infectados com P. brasiliensis. Quando camundongos da linhagem BALB/c foram infectados pela via intratraqueal com 3 × 105 leveduras de P. brasiliensis, tratados no dia 20 após a infecção com um dos adjuvantes e analisados 30 dias após a administração do tratamento, observou-se que MPLA, ao contrário dos outros adjuvantes, induziu (1) uma redução significativa no número de unidades formadoras de colônias (UFC), (2) uma expressiva diminuição no número de granulomas e células fúngicas no tecido pulmonar e (3) uma resposta imunológica protetora (Th1) quando comparado aos animais controle tratados com PBS. Quanto ao rastreamento de antígenos de P. brasiliensis candidatos a agentes terapêuticos, evidenciou-se que as frações proteicas da preparação de exoantígenos (ExoAg) eram as mais promissoras. Dentre essas frações, a que continha o ExoAg majoritário diidrolipoildesidrogenase induziu maior porcentagem de proliferação de linfócitos T CD3+ esplênicos de camundongos infectados e tratados com MPLA. O gene de diidrolipoil desidrogenase foi clonado em vetor de expressão e a proteína recombinante produzida, purificada e utilizada no protocolo terapêutico da PCM experimental. Surpreendentemente, a administração terapêutica de diidrolipoil desidrogenase recombinante induziu uma redução significativa na contagem de UFC dos animais infectados cronicamente com P. brasiliensis, mesmo na ausência de adjuvantes, o que não foi observado quando foi administrada a preparação de ExoAg nos animais. A localização subcelular de diidrolipoil desidrogenase, por microscopia eletrônica de transmissão, utilizando anticorpos policlonais de camundongos contra essa proteína, mostrou que a mesma está localizada na mitocôndria e também no citoplasma. A análise da expressão gênica diferencial de diidrolipoil desidrogenase em P. brasiliensis mostrou que essa proteína é significativamente mais expressa em leveduras em comparação a hifas e formas de transição. Em conclusão, nossos resultados mostram os efeitos benéficos de MPLA na PCM experimental e sugerem que diidrolipoil desidrogenase é um alvo terapêutico potencial para o tratamento da PCM
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2016
- Data da defesa: 26.09.2016
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ABNT
LANDGRAF, Taise Natali. Monofosforil lipídeo A e diidrolipoil desidrogenase deParacoccidioides brasiliensis têm efeito terapêutico na paracoccidiodomicose experimental. 2016. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2016. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-06012017-165041/. Acesso em: 21 maio 2024. -
APA
Landgraf, T. N. (2016). Monofosforil lipídeo A e diidrolipoil desidrogenase deParacoccidioides brasiliensis têm efeito terapêutico na paracoccidiodomicose experimental (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-06012017-165041/ -
NLM
Landgraf TN. Monofosforil lipídeo A e diidrolipoil desidrogenase deParacoccidioides brasiliensis têm efeito terapêutico na paracoccidiodomicose experimental [Internet]. 2016 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-06012017-165041/ -
Vancouver
Landgraf TN. Monofosforil lipídeo A e diidrolipoil desidrogenase deParacoccidioides brasiliensis têm efeito terapêutico na paracoccidiodomicose experimental [Internet]. 2016 ;[citado 2024 maio 21 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-06012017-165041/
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