Desenvolvimento de um sistema induzível de expressão mediado pela Cre-recombinase para a caracterização do domínio C-terminal da proteína Rad9 de Leishmania major (2017)
- Authors:
- Autor USP: SANTOS, RENATO ELIAS RODRIGUES DE SOUZA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: LEISHMANIA; EXPRESSÃO GÊNICA
- Keywords: Cre-recombinase; Cre-recombinase; Leishmania; Leishmania; Rad9
- Language: Português
- Abstract: O desenvolvimento de novas ferramentas para manipulação genética é necessário para um melhor entendimento da biologia de protozoários que causam doenças séries e negligenciadas. Neste contexto, apresentamos uma nova aplicação do sistema Cre recombinase em Leishmania major, utilizado para a expressão condicional de genes de interesse. Como prova de conceito demonstramos por ensaios de PCR, western blotting e imunofluorescência que o gene da Proteína Fluorescente Verde (Green Fluorescent Protein, GFP) é condicionalmente expresso em função do tempo e dose de rapamicina necessários para a ativação da recombinase. A aplicação do sistema diCre em L. major é feita com o estudo da proteína Radar que participa na sinalização e resposta a danos ao DNA. A Rad9 de L. major possui um domínio C-terminal desestruturado, que no homólogo humano não é essencial para a formação do complexo 911 (Rad9-Hus1-Rad1), mas possui sítios de fosforilação importantes para a cascata de sinalização que mantém a integridade do DNA. Usando predições da estrutura de Rad9, a proteína foi dividida em domínios e foram geradas linhagens que expressam, condicionalmente, versões truncadas de Rad9. Por análises de PCR, western blotting, citometria de fluxo e imunofluorescência, acessamos alguns dos papeis que o domínio C-terminal de Rad9 pode desempenhar em L. major
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2017
- Data da defesa: 17.04.2017
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ABNT
SANTOS, Renato Elias Rodrigues de Souza. Desenvolvimento de um sistema induzível de expressão mediado pela Cre-recombinase para a caracterização do domínio C-terminal da proteína Rad9 de Leishmania major. 2017. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2017. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-25042018-162053/. Acesso em: 12 jun. 2024. -
APA
Santos, R. E. R. de S. (2017). Desenvolvimento de um sistema induzível de expressão mediado pela Cre-recombinase para a caracterização do domínio C-terminal da proteína Rad9 de Leishmania major (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-25042018-162053/ -
NLM
Santos RER de S. Desenvolvimento de um sistema induzível de expressão mediado pela Cre-recombinase para a caracterização do domínio C-terminal da proteína Rad9 de Leishmania major [Internet]. 2017 ;[citado 2024 jun. 12 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-25042018-162053/ -
Vancouver
Santos RER de S. Desenvolvimento de um sistema induzível de expressão mediado pela Cre-recombinase para a caracterização do domínio C-terminal da proteína Rad9 de Leishmania major [Internet]. 2017 ;[citado 2024 jun. 12 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-25042018-162053/ - Fatores de transcrição da família Fur e a resposta a ferro e zinco em Chromobacterium violaceum
- ZnuCBA é um transportador de zinco que afeta a virulência do patógeno oportunista Chromabacterium violaceum
- The zinc transporter ZnuABC is critical for the virulence of Chromobacterium violaceum and contributes to diverse zinc-dependent physiological processes
- Trypanosoma rangeli 28Sb ribosomal gene allows intra and interspecific molecular differentiation
- Ferric uptake regulator fur coordinates siderophore production and defense against iron toxicity and oxidative stress and contributes to virulence in Chromobacterium violaceum
- Production and uptake of distinct endogenous catecholate-type siderophores are required for iron acquisition and virulence in Chromobacterium violaceum
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