Effect of titanium tetrafluoride varnish on fibroblasts (NIH/3T3): viability assay, morphological analysis and cell signals for apoptotic pathways (2018)
- Authors:
- Autor USP: SALOMÃO, PRISCILA MARIA ARANDA - FOB
- Unidade: FOB
- Sigla do Departamento: BAE
- Subjects: FORRAMENTO DA CAVIDADE DENTÁRIA; FLUORETO; TITÂNIO; FIBROBLASTOS; MORFOLOGIA DENTÁRIA; APOPTOSE; CÁRIE DENTÁRIA; EROSÃO DE DENTE; TOXICIDADE DO FLÚOR
- Language: Inglês
- Abstract: Conhecimento atual suporta a aplicação de verniz de TiF4 para proteção contra cárie e erosão dentárias; entretanto, é indispensável conhecer o seu potencial citotóxico e o mecanismo envolvido antes de aplicá-lo em pacientes. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar 1) o efeito citotóxico do verniz de tetrafluoreto de Titânio (TiF4) comparado ao fluoreto de sódio (NaF), em fibroblastos NIH/3T3, variando a concentração de fluoreto e o tempo de tratamento 2) a porcentagem de apoptose e seus mecanismos (ambos mitocondrial mediado pela família Bcl-2 e pelo receptor de morte celular) em fibroblastos gengivais humanos (FGH) e fibroblastos murinos (NIH/3T3) tratados com verniz de TiF4 comparado com verniz de NaF por 6 h. Etapa 1) NIH/3T3 foram expostos a vernizes de NaF e TiF4 contendo 0,95, 1,95 ou 2,45% F, por 6, 12 ou 24 h. Ensaios de viabilidade por MTT (n=6) e Hoechst 33342/iodeto de propídeo (n=3) bem como a morfologia (HE, apenas para 24 h, n = 3) e a rigidez celular (MFA, apenas para 2,45% F, 6 ou 12 h) foram realizados. Ambos os vernizes com 1,90 e 2,45% F reduziram a viabilidade das células de forma semelhante (33-86% em 6 h, 35-93% em 12 h e 87-98% em 24 h) em comparação com o controle, independentemente do tipo de fluoreto. TiF4 e NaF (2,45%) reduziram de forma similar a rigidez celular, mas somente TiF4 diferiu do controle no período de 6 h. Etapa 2) FGH e NIH/3T3 foram tratadas com verniz de NaF ou TiF4 por 6h. As células foram examinadas pelo método de TUNEL, usando microscopia de fluorescência. A atividade das caspases -3, -8 e -9 foram avaliadas. O cDNA para citocromo C, Bax, Bad, Bcl-2, VDAC-1 e Fas-L foi amplificado e quantificado por PCR em tempo real (qPCR). A expressão das proteínas Bax, Bcl-2 e Fas-L foi quantificada por western blot. Ambos os fluoretos aumentaram de forma semelhante a porcentagem de apoptose,enquanto falharam na ativação de caspases-3, -8 e -9 para ambos tipos celulares. A expressão gênica da relação Bax/Bcl-2, do citocromo C e do VDAC-1 não foram alteradas por ambos fluoretos. No entanto, o verniz NaF aumentou a amplificação do gene Fas-L para ambas as células, enquanto que o verniz TiF4 induziu menor expressão da razão Bad/Bcl-2 em comparação com o controle para NIH/3T3, mas não para FGH. Nenhum efeito foi detectado na análise de proteínas. TiF4 e NaF apresentam citotoxicidade similar em NIH/3T3, a qual é dependente da concentração de F e do tempo de exposição. Ambos os fluoretos, nas condições estudadas, induzem uma baixa porcentagem de apoptose, com consequente modesta ativação das vias de sinalização dependentes de Bcl-2 e Fas-L.
- Imprenta:
- Data da defesa: 09.02.2018
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ABNT
SALOMÃO, Priscila Maria Aranda. Effect of titanium tetrafluoride varnish on fibroblasts (NIH/3T3): viability assay, morphological analysis and cell signals for apoptotic pathways. 2018. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Bauru, 2018. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Salomão, P. M. A. (2018). Effect of titanium tetrafluoride varnish on fibroblasts (NIH/3T3): viability assay, morphological analysis and cell signals for apoptotic pathways (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Bauru. -
NLM
Salomão PMA. Effect of titanium tetrafluoride varnish on fibroblasts (NIH/3T3): viability assay, morphological analysis and cell signals for apoptotic pathways. 2018 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Salomão PMA. Effect of titanium tetrafluoride varnish on fibroblasts (NIH/3T3): viability assay, morphological analysis and cell signals for apoptotic pathways. 2018 ;[citado 2024 abr. 19 ] - Efeito do tipo de lesão cariosa artificial em esmalte bovino sobre o potencial remineralizante da saliva, do dentifrício e do verniz fluoretado: um estudo in situ
- Effect of extrinsic and intrinsic acids in the development of enamel erosion and erosive wear
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