DNA fetal e miRNAs circulantes no plasma sanguíneo materno como marcadores de potencial e qualidade em gestações de clones bovinos (2016)
- Authors:
- Autor USP: BEM, TIAGO HENRIQUE CAMARA DE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RGE
- Subjects: GENÉTICA; CLONAGEM ANIMAL; RNA; FETO
- Language: Português
- Abstract: Bovinos clonados por TNCS apresentam alta taxa de abortos, sendo a maior parte das perdas embrionárias devido à problemas de malformação placentária. A descoberta de DNA fetal no plasma sanguíneo de mulheres grávidas pode ser utilizado como um prognóstico gestacional, uma vez que a quantidade de DNA fetal esta associado com o estado do trofoblasto. MiRNAs são pequenas RNAs não codificadores com aproximadamente 20-24 nucleotídeos de comprimento e em humanos, miRNAs também tem sido associados com complicações gestacionais. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi obter um marcador molecular não invasivo através da detecção de DNA fetal e da determinação do perfil de miRNAs circulantes, no plasma sanguíneo de vacas prenhes de clones bovinos em fases inicias da gestação. Para tanto, embriões clones machos foram transferidos para receptoras previamente sincronizadas. Para a detecção do DNA fetal circulante no sangue materno foi utilizado o gene TSPY (Y-específico) e amostras de sangue foram coletadas das receptoras prenhes (n= 13) aos: 7, 21, 30, 60 e 90 dias de gestação. Para a determinação do perfil de miRNAs circulantes no sangue materno de vacas gestantes de clones foi realizado um painel contendo 348 miRNAs e amostras de sangue foram coletadas das receptoras prenhes aos 21 dias da gestação. Para as avaliações dos miRNAs foram considerados três grupos distintos de gestações: 1) gestações de clones (n=3) abortadas precocemente e de forma natural (C-PGP); 2) gestações de clones (n=3) que atingem fases avançadas da gestação (C-GA); 3) gestações produzidas por inseminação artificial (n=4) que atingem fases avançadas da gestação (IA-GA). Não foi detectado DNA fetal circulante no plasma das receptoras em nehuma das gestações de clones avaliadas e em nehuma das fases da gestação. Com relação ao perfil inicial de miRNAs, foram detectados 275 (83,3%) em comuns aostrês grupos: C-PGP, C-GA e IA-GA. Destes, 58 miRNAs (21,1%) foram diferencialmente expressos entre os grupos (P<0,05) avaliados. Do total de 58 miRNAs diferencialmente expressos, 33 miRNAs (57,0%) estavam desregulados (down-regulated) (P<0,05) no grupo C-PGP em relação aos grupos C-GA e IA-GA (ambos up-regulated) e estes não diferiram entre si (P>0,05). A análise de bioinformática dos 33 miRNAs desregulados nos revelou as vias de sinalização e os clusters funcionais dos relacionados genes preditos. Dentre as vias destacam-se: a via de sinalização em câncer, a via de sinalização p53, a via de sinalização MAPK, a via de sinalização Jak-STAT, a via de sinalização ErbB e a via de sinalização de adesão focal. Dentre os cluster funcionais destacam-se: o controle da morte celular programada e apoptose, desenvolvimento e morfologia vascular (angiogênese), o desenvolvimento embrionário intrauterino e o desenvolvimento dos órgãos e sistemas do embrião. Em conclusão, a detecção do DNA fetal circulante no plasma sanguíneo materno através do gene TSPY não é um bom marcador molecular para gestações de clones bovinos em fases inicias da gestação. Adicionalmente, existe uma desregulação (down-regulation) dos miRNAs circulantes abortadas de clones bovinos precocemente, em relação as prenhezes que atingem fases avançadas da gestação
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2016
- Data da defesa: 04.08.2016
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ABNT
BEM, Tiago Henrique Camara de. DNA fetal e miRNAs circulantes no plasma sanguíneo materno como marcadores de potencial e qualidade em gestações de clones bovinos. 2016. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2016. . Acesso em: 26 abr. 2024. -
APA
Bem, T. H. C. de. (2016). DNA fetal e miRNAs circulantes no plasma sanguíneo materno como marcadores de potencial e qualidade em gestações de clones bovinos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Bem THC de. DNA fetal e miRNAs circulantes no plasma sanguíneo materno como marcadores de potencial e qualidade em gestações de clones bovinos. 2016 ;[citado 2024 abr. 26 ] -
Vancouver
Bem THC de. DNA fetal e miRNAs circulantes no plasma sanguíneo materno como marcadores de potencial e qualidade em gestações de clones bovinos. 2016 ;[citado 2024 abr. 26 ] - Efeito da pré-maturação sobre o desenvolvimento embrionário de oócitos submetidos à ativação partenogenética e transferência de núcleo
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