Caracterização preliminar do isolamento de oligômeros do peptídeo β-amiloide utilizando o anticorpo de cadeia única NUsc1 (2018)
- Authors:
- Autor USP: CAMPOS, RAQUEL MARIA DE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: BIOQUÍMICA; PEPTÍDEOS; DOENÇA DE ALZHEIMER; CROMATOGRAFIA
- Keywords: Cromatografia de gel-filtração; Doença de Alzheimer; NUsc1; Oligômeros solúveis; Peptídeo β-amiloide; β-amyloid peptide; Alzheimer's disease; Gel filtration chromatography; NUsc1; Soluble oligomers
- Language: Português
- Abstract: A Doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurodegenerativa que afeta atualmente cerca de 47 milhões de pessoas no mundo inteiro. A patogênese da DA tem sido associada a agregados oligoméricos solúveis do peptídeo, β-amiloide (AβOs). Por terem sido apontados como os responsáveis por comprometer a plasticidade sináptica e a memoria, os AβOs se tornaram os principais alvos de estudos na busca por tratamentos para a DA. A imunização passiva constitui uma das estratégias terapêuticas mais promissoras para a neutralização dos AβOs. Um anticorpo que tem demonstrado dados promissores quanto à sua especificidade contra subpopulações oligoméricas neurotóxicas é o anticorpo de cadeia única NUsc1. Nesse trabalho, nosso objetivo foi determinar as condições ótimas para a elucidação da massa molecular (estado oligomérico) da(s) espécie(s) oligoméricas do peptídeo, β-amiloide alvo do anticorpo de cadeia única NUsc1. Para isso, avaliamos preparações de oligômeros sintéticos submetidos a gel-filtração, na ausência ou presença de NUsc1, através do monitoramento por fluorescência e análises por ELISA, dot blot e espectrometria de massas. Nossos dados mostram que fomos capazes de produzir o anticorpo NUsc1 ligado a fago (pbNUsc1) funcional. Entretanto, em AβOs fracionados por SEC, apenas espécies de baixo peso molecular foram detectados em ELISA usando pbNUsc1 como anticorpo de detecção. Acreditamos que a ausência ou pouca abundância de espécies oligoméricas de Aβ de alto peso molecular na preparação de oligômeros usada nesse trabalho tenha influenciado nesses resultados. A fim de aumentar nossa capacidade de detecção de espécies pouco abundantes, desenvolvemos um método preliminar para detecção de Aβ por espectrometria de massas, visando análises futura do complexo NUsc1/AβOs
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2018
- Data da defesa: 08.03.2018
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ABNT
CAMPOS, Raquel Maria de. Caracterização preliminar do isolamento de oligômeros do peptídeo β-amiloide utilizando o anticorpo de cadeia única NUsc1. 2018. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2018. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-07022022-140423/. Acesso em: 20 maio 2024. -
APA
Campos, R. M. de. (2018). Caracterização preliminar do isolamento de oligômeros do peptídeo β-amiloide utilizando o anticorpo de cadeia única NUsc1 (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-07022022-140423/ -
NLM
Campos RM de. Caracterização preliminar do isolamento de oligômeros do peptídeo β-amiloide utilizando o anticorpo de cadeia única NUsc1 [Internet]. 2018 ;[citado 2024 maio 20 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-07022022-140423/ -
Vancouver
Campos RM de. Caracterização preliminar do isolamento de oligômeros do peptídeo β-amiloide utilizando o anticorpo de cadeia única NUsc1 [Internet]. 2018 ;[citado 2024 maio 20 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17131/tde-07022022-140423/ - Novas abordagens para detecção e caracterização bioquímica dos principais biomarcadores da doença de Alzheimer
- Antibody fragments as tools for elucidating structure-toxicity relationships and for diagnostic/therapeutic targeting of neurotoxic amyloid oligomers
- A freeze-and-thaw-induced fragment of the microtubule-associated protein tau in rat brain extracts: implications for the biochemical assessment of neurotoxicity
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