Clonagem e caracterização da enzima epóxido hidrolase de Trichoderma reesei (2018)
- Authors:
- Autor USP: OLIVEIRA, GABRIEL STEPHANI DE - BIOTECNOLOGIA
- Unidade: BIOTECNOLOGIA
- Subjects: TRICHODERMA; ENZIMAS HIDROLÍTICAS; ATIVAÇÃO ENZIMÁTICA; CLONAGEM; CATALISADORES; CATALASE
- Keywords: Enantioselectivity; Enantiosseletividade; Epoxide hydrolase; Époxido hidrolase; Fungo; Fungus; Inhibitor; Inibidor; Trichoderma reesei; Trichoderma reesei
- Language: Português
- Abstract: Epóxido hidrolases (EHs) são enzimas que catalisam a hidrólise de epóxidos a seus correspondentes dióis, apresentam potencial aplicação biotecnológica (separação de enantiômeros na produção de fármacos), estão envolvidas no metabolismo de ácidos graxos poliinsaturados e inibidores de EHs estão sendo estudados para possível utilização no tratamento de doenças. Uma enzima epóxido hidrolase (TrEH) do fungo filamentoso Trichoderma reesei QM9414 foi clonada, expressa, purificada e caracterizada funcionalmente e estruturalmente. A atividade de TrEH foi determinada com o substrato óxido de estireno (racêmico), demonstrando maior atividade nas temperaturas de 23 a 50 ºC, no pH 7,2 a 37 ºC, e as constantes cataliticas Km= 4,6 mM e kcat= 336 s-1. A enzima recombinante mostrou ser enantiosseletiva, pois hidrolisa preferencialmente (S)-(-)-óxido de estireno, (R)-(-)- epicloridrina e (S)-(-)-1,2-epoxibutano. Moléculas inibidoras da atividade de TrEH foram identificadas e algumas delas inibem até 60% o crescimento de T. reesei. A estrutura terciária de TrEH (1,7 Å) foi determinada por cristalografia, apresenta dobramento α/β-hidrolase e não tem alta homologia com nenhuma outra estrutura de EH. TrEH é uma nova enzima epóxido hidrolase solúvel cujas propriedades mostram seu potencial de utilização em aplicações biotecnológicas
- Imprenta:
- Data da defesa: 16.05.2018
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ABNT
OLIVEIRA, Gabriel Stephani de. Clonagem e caracterização da enzima epóxido hidrolase de Trichoderma reesei. 2018. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-03122018-142014/. Acesso em: 30 abr. 2024. -
APA
Oliveira, G. S. de. (2018). Clonagem e caracterização da enzima epóxido hidrolase de Trichoderma reesei (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-03122018-142014/ -
NLM
Oliveira GS de. Clonagem e caracterização da enzima epóxido hidrolase de Trichoderma reesei [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 30 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-03122018-142014/ -
Vancouver
Oliveira GS de. Clonagem e caracterização da enzima epóxido hidrolase de Trichoderma reesei [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 30 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-03122018-142014/ - An epoxide hydrolase from endophytic Streptomyces shows unique structural features and wide biocatalytic activity
- Structural and functional characterization of the glutathione peroxidase-like thioredoxin peroxidase from the fungus Trichoderma reesei
- Enzyme-catalyzed spiroacetal formation in polyketide antibiotic biosynthesis
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