Espectroscopia de força atômica em células de melanoma e queratinócitos (2019)
- Authors:
- Autor USP: REINOZA, NATALY ZARIBETH HERRERA - IF
- Unidade: IF
- Sigla do Departamento: FAP
- Subjects: MICROSCOPIA DE FORÇA ATÔMICA; MELANOMA
- Keywords: QUERATINÓCITOS; MÓDULO DE ELASTICIDADE; FORCE VOLUME; AFM; ELASTIC MODULUS; KERATINOCYTES; MELANOMA
- Agências de fomento:
- Language: Inglês
- Abstract: Neste trabalho, utilizamos espectroscopia de força atômica para obtenção do módulo elástico de células fixadas de melanoma e queratinócitos, com o objetivo de determinar as condições iniciais de estudos a serem realizados futuramente de culturas de células confluentes do mesmo tipo. As linhagem celulares utilizadas foram as células HaCaT e as células de melanoma WM1366, sendo a última derivada de um melanoma de crescimento radial sendo analisadas tanto as células parentais (células WM1366 shSCR) e as células WM1366 silenciadas com galectina-3 (WM1366 shGal3). As células foram localizadas e imageadas no modo AFM contato em meio líquido. Curvas de força adquiridas na região central das células foram utilizadas para determinar o módulo elástico, a partir do modelo de contato hertziano por uma ponta piramidal, permitindo estabelecer um padrão para comparação entre células normais e cancerígenas. Verificou-se que a célula de melanoma exibe menor módulo de elasticidade (21.8 ± 0.5 kPa) do que as células de queratinócitos (31.9 ± 0.4 kPa). Para as células WM1366 shGal3 foi encontrado um módulo elástico de 16.1 ± 0.6 kPa. Portanto, verificou-se que, para grandes profundidades de indentação, é possível distinguir entre a mesma linhagem de melanoma, células que apresentam alterações gerais na organização do citoesqueleto induzidas pela presença ou ausência da proteína galectina-3. Por outro lado, para detectar variações locais do módulo elástico ao longo da célula e identificar regiões subcelulares, caracterizadas por rigidez específica associada a estruturas locais, foram obtidos mapas de elasticidade nos quais uma única curva de força é adquirida em cada posição da sonda.Para interpretar estes mapas, a célula foi dividida em regiões de diferentes alturas e curvas de cada seção de altura foram analisadas e representadas em histogramas, ajustadas pela função de distribuição binomial. Observou-se que o gradiente de módulo de elasticidade em células da região nuclear em direção à periferia celular é mais acentuado em células desprovidas de galectina-3 do que em células parentais. O aumento do módulo de elasticidade na região pericelular das células desprovidas de galectina-3 sugere que a organização da matriz extracelular nestas áreas é diferente das observadas em torno das células HaCaT e shSCR WM1366.
- Imprenta:
- Data da defesa: 28.03.2019
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ABNT
HERRERA REINOZA, Nataly Zaribeth. Espectroscopia de força atômica em células de melanoma e queratinócitos. 2019. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2019. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/43/43134/tde-22042019-094701/. Acesso em: 28 abr. 2024. -
APA
Herrera Reinoza, N. Z. (2019). Espectroscopia de força atômica em células de melanoma e queratinócitos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/43/43134/tde-22042019-094701/ -
NLM
Herrera Reinoza NZ. Espectroscopia de força atômica em células de melanoma e queratinócitos [Internet]. 2019 ;[citado 2024 abr. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/43/43134/tde-22042019-094701/ -
Vancouver
Herrera Reinoza NZ. Espectroscopia de força atômica em células de melanoma e queratinócitos [Internet]. 2019 ;[citado 2024 abr. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/43/43134/tde-22042019-094701/
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