Papel da fímbria ECP na patogênese de Escherichia coli enteropatogênica atípica (2020)
- Authors:
- Autor USP: MUNHOZ, DANIELLE DIAS - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMM
- Subjects: GENÉTICA BACTERIANA; ESCHERICHIA COLI; TELEOSTEI
- Keywords: E. coli common pilus; E. coli common pilus; Escherichia coli; Escherichia coli; Zebrafish; Pathogenesis; Patogênese; Zebrafish
- Language: Português
- Abstract: Um passo essencial na colonização do trato gastrointestinal por um patógeno é a adesão à superfície da célula hospedeira e é uma fase crítica nas infecções causadas por Escherichia coli enteropatogênica. Algumas adesinas estão envolvidas no processo multifatorial que é a adesão bacteriana. Entre elas, estruturas denominadas fímbrias compreendem um grupo de adesinas que permite a ligação inicial de bactérias a células epiteliais e subsequente colonização. E. coli enteropatogênica atípica (aEPEC) é um patótipo heterogêneo e nenhum marcador de adesão representativo foi identificado até o momento. A maioria das cepas patogênicas e não patogênicas de E. coli apresentam a fímbria E. coli common pilus (ECP) e, apesar da importância in vitro, não há relatos de sua função na infecção in vivo por aEPEC. Nesse contexto, o zebrafish foi selecionado como modelo de infecção por apresentar as seguintes vantagens: pequeno tamanho, tempo de geração curto, similaridade genômica com mamíferos e sistema imunológico bem desenvolvido. A sua transparência durante o desenvolvimento permite acompanhar a colonização intestinal por patógenos e interações micróbio-hospedeiro, em tempo real, durante todo o curso da infecção. Além disso, o intestino deste animal apresenta microbiota, anatomia e células semelhantes ao intestino de mamíferos, sendo um excelente modelo para a caracterização de adesinas de aEPEC. No presente estudo, avaliamos o papel de ECP na patogênese da aEPEC em um modelo in vivo.Nossos resultados mostraram que 96% das cepas de aEPEC possuem operon ecp completo e 55% são produtores de ECP. A deleção em ecpA ou ecpRABCDE não afetou a capacidade de crescimento, motilidade ou alterou o padrão de biofilme. A BA1250 colonizou efetivamente o zebrafish ao longo do ensaio de colonização intestinal. Como esperado, o ΔcpA teve uma redução significativa na adesão comparado com WT. Surpreendentemente, o ΔRABCDE não reduziu a adesão e colonizou consistentemente por 72 hpi. ΔRABCDE::mCherry mostrou modificação do local de colonização em comparação com o WT apenas nas 24 hpi iniciais, revertida para o mesmo padrão observado no WT após 72 hpi. Para estudar o papel da ECP em diferentes locais de infecção, os embriões foram infectados na cavidade pericárdica. Nas infecções por WT e ΔRABCDE, apenas 25 e 32% dos embriões sobreviveram, respectivamente. Por outro lado, 100% dos embriões sobreviveram na infecção por ΔecpA. Em uma infecção sistêmica, observou-se um padrão de sobrevivência semelhante, onde 86% dos embriões infectados com ΔecpA sobreviveram, em comparação com 52 e 41% de sobrevida nas infecções por WT e ΔecpRABCDE, respectivamente. Este estudo estabeleceu um modelo in vivo que permite uma triagem rápida de quais estruturas de adesão são essenciais para infecções por aEPEC. Também revelou que a ECP é realmente importante não apenas para a adesão intestinal, mas pode ser uma estrutura crucial para outros grupos de E. coli colonizarem locais diferentes.
- Imprenta:
- Data da defesa: 13.03.2020
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ABNT
MUNHOZ, Danielle Dias. Papel da fímbria ECP na patogênese de Escherichia coli enteropatogênica atípica. 2020. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04012022-135948/. Acesso em: 11 maio 2024. -
APA
Munhoz, D. D. (2020). Papel da fímbria ECP na patogênese de Escherichia coli enteropatogênica atípica (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04012022-135948/ -
NLM
Munhoz DD. Papel da fímbria ECP na patogênese de Escherichia coli enteropatogênica atípica [Internet]. 2020 ;[citado 2024 maio 11 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04012022-135948/ -
Vancouver
Munhoz DD. Papel da fímbria ECP na patogênese de Escherichia coli enteropatogênica atípica [Internet]. 2020 ;[citado 2024 maio 11 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-04012022-135948/
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