Participação das vias de sinalização Wnt no potencial osteogênico de superfície de titânio com nanotopografia (2019)
- Authors:
- Autor USP: ABUNA, RODRIGO PAOLO FLORES - FORP
- Unidade: FORP
- Sigla do Departamento: 803
- DOI: 10.11606/T.58.2019.tde-23092019-151345
- Subjects: OSTEOBLASTO; TITÂNIO; OSTEOGÊNESE; NANOTECNOLOGIA; IMPLANTODONTIA
- Keywords: Beta-catenin; Beta-catenina; CRISPR; Nanotopografia; Nanotopography; Osteoblast; Titanium; Wnt
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A transdução do sinal Wnt é responsável pela organização estrutural durante a embriogênese, participando da estimulação mitogênica, diferenciação celular e homeostase de tecidos adultos, incluindo o tecido ósseo. É bem estabelecido que a superfície de titânio com nanotopografia (Ti-Nano) favorece a diferenciação osteoblástica por modular as vias de sinalização das integrinas e proteínas ósseas morfogenéticas (BMPs). Porém, poucos estudos têm abordado a participação da via Wnt nos efeitos da topografia em nanoescala. Portanto, formulamos a hipótese de que a via de sinalização Wnt está, ao menos em parte, envolvida no maior potencial osteogênico da superfície de Ti-Nano. Para testar essa hipótese, utilizamos discos de Ti, que foram tratados com solução de H2SO4/H2O2 para produzir superfícies nanotopográficas, e discos sem tratamento (Ti-Usinado), sendo considerados como controle. Células da linhagem MC3T3-E1, subclone 14, foram cultivadas sobre ambos os discos para avaliar o efeito do Ti-Nano sobre a expressão de genes relacionados às vias de sinalização canônica Wnt/β-catenina e não canônica Wnt/Ca2+. Com base nos resultados do PCR em tempo real, os genes mais intensamente modulados pela superfície de Ti-Nano, Fzd4 relacionado à via Wnt/β-catenina e Fzd6 relacionado à via Wnt/Ca2+, foram selecionados e silenciados por CRISPR-dCas9-KRAB e CRISPR-Cas9, respectivamente. Então, foi investigado o efeito desses silenciamentos sobre o potencial osteogênico em células MC3T3-E1, cultivadas sobre Ti-Nano e Ti-Usinado. Os dados foram comparados pelo Teste t de Student ou pelo teste ANOVA one-way (p≤0,05). Os resultados deste estudo revelaram que: 1) o silenciamento do gene Fzd4 inibe a expressão do genótipo e fenótipo osteoblástico de células MC3T3-E1, coincidindo com a modulação negativa de alvos da via Wnt/β-catenina aos 5 dias sobresuperfície de Ti-Nano; 2) o silenciamento de Fzd6 inibe a expressão do genótipo e fenótipo osteoblástico de células MC3T3-E1; no entanto, os alvos da via Wnt/Ca2+ não foram modulados, e observou-se expressão negativa da proteína β-catenina aos 3 dias de cultivo das células MC3T3-E1 sobre Ti-Nano. Estes resultados indicam que o maior potencial osteogênico da nanotopografia deve-se, ao menos em parte, à ativação da via de sinalização Wnt/β-catenina, uma vez que o silenciamento dos genes Fdz4 e Fzd6 reduziu intensamente a diferenciação osteoblástica de células MC3T3-E1 crescidas sobre Ti-Nano, comparado ao Ti-Usinado. Em conjunto, nossos resultados revelam um novo mecanismo que envolve a via Wnt/β-catenina para explicar o maior potencial osteogênico da superfície com nanotopografia aqui avaliada
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- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2019
- Data da defesa: 03.05.2019
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
ABUNÁ, Rodrigo Paolo Flores. Participação das vias de sinalização Wnt no potencial osteogênico de superfície de titânio com nanotopografia. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2019. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58138/tde-23092019-151345/. Acesso em: 03 maio 2024. -
APA
Abuná, R. P. F. (2019). Participação das vias de sinalização Wnt no potencial osteogênico de superfície de titânio com nanotopografia (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58138/tde-23092019-151345/ -
NLM
Abuná RPF. Participação das vias de sinalização Wnt no potencial osteogênico de superfície de titânio com nanotopografia [Internet]. 2019 ;[citado 2024 maio 03 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58138/tde-23092019-151345/ -
Vancouver
Abuná RPF. Participação das vias de sinalização Wnt no potencial osteogênico de superfície de titânio com nanotopografia [Internet]. 2019 ;[citado 2024 maio 03 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58138/tde-23092019-151345/ - Análise do potencial osteogênico e adipogênico de células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea e de tecido adiposo
- Avaliação in vitro do efeito isolado e associado da isoflavona e do licopeno na atividade funcional de células osteoblásticas MC3T3-E1
- Efeito autócrino de osteoblastos co-cultivados com adipócitos na diferenciação osteoblástica
- Inibição da diferenciação osteoblástica por efeito autócrino de osteoblastos co-cultivados com adipócitos
- Frizzled 6 disruption suppresses osteoblast differentiation induced by nanotopography through the canonical Wnt signaling pathway
- Avaliação in vitro do efeito isolado e associado da isoflavona e do licopeno na atividade funcional de células osteoblásticas MC3T3-E1
- The Wnt/β-catenin signaling pathway is regulated by titanium with nanotopography to induce osteoblast differentiation
- Osteoporosis and osteoblasts cocultured with adipocytes inhibit osteoblast differentiation by downregulating histone acetylation
- Selection of reference genes for quantitative real-time polymerase chain reaction studies in rat osteoblasts
- Adipocytes and osteoporosis inhibit osteoblast differentiation by downregulating histone acetylation
Informações sobre o DOI: 10.11606/T.58.2019.tde-23092019-151345 (Fonte: oaDOI API)
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