Characterization of the Leishmania major Rad1 protein as a subunit od the 9-1-1 complex in the response to replication stress an DNA damage (2019)
- Authors:
- Autor USP: SANTOS, ELAINE VIEIRA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: LEISHMANIA; TRYPANOSOMATIDAE
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Em mamíferos e leveduras, o complexo heterotrimérico formado pelas proteínas Rad9, Rad1 e Hus1 (9-1-1) participa na etapa inicial de reconhecimento e sinalização do estresse replicativo. Nosso laboratório conduziu a caracterização das proteínas de Leishmania major Hus1 e Rad9. Neste sentido, o objetivo do nosso estudo foi investigar a existência da proteína faltante, homóloga de Rad1, no contexto de um possível complexo 9-1-1 em L. major. Mais especificamente nossos objetivos foram: (i) estudas a expressão, localização subcelular e interação in vivo/in vitro de Rad1 com as proteínas Rad9 e Hus1; (ii) gerar linhagens do parasito onde a expressão do gene Rad1 tenha sido aumentada, modulada ou abolida; (iii) analisar se a expressão alterada de Rad1 interfere na resposta do parasito ao estresse replicativo ou na expressão e localização subcelular de Rad9 e Hus1. Analisamos o perfil de crescimento da linhagem que superexpressa o gene Rad1 e demonstramos os níveis de Rad1 em resposta ao estresse replicativo. Em paralelo, mostramos que a superexpressão das subunidades 9-1-1 revelam efeitos divergentes na resposta do parasito a agentes genotóxicos. Nossos dados mostram que tanto Rad1 quanto as proteínas Rad9 e Hus1 são enriquecidas na cromatina em resposta ao estresse genotóxico e que Rad1 interage com as proteínas já caracterizadas, Rad9 e Hus1. Experimentos de imunofluorescência realizado em linhagens que expressam níveis endógenos das subunidades 9-1-1 evidenciaram a dinâmica da localização subcelular destas proteínas. Rad9 e Hus1 são proteínas que localizam-se majoritariamente no núcleo do parasita. Em oposição, Rad1 demonstra perfil de distribuição nos compartimentos citoplasmático e nuclear de L. major. Também investigamos a localização destas proteínas em resposta ao estresse replicativo e observamos o perfil de redistribuição nuclear de Rad9, Rad1 e Hus1. Em seu conjunto, estas observações contribuempara melhor entendermos sobre a estrutura e função do complexo 9-1-1 em Leishmania. Em adição, pode contribuir para melhor compreensão dos mecanismos de manutenção do genoma eucariótico, bem como, as estratégias utilizadas por este parasito para lidar com lesões no DNA e adaptar-se a seu ambiente
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2019
- Data da defesa: 19.12.2017
-
ABNT
SANTOS, Elaine Vieira. Characterization of the Leishmania major Rad1 protein as a subunit od the 9-1-1 complex in the response to replication stress an DNA damage. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2019. . Acesso em: 21 maio 2024. -
APA
Santos, E. V. (2019). Characterization of the Leishmania major Rad1 protein as a subunit od the 9-1-1 complex in the response to replication stress an DNA damage (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Santos EV. Characterization of the Leishmania major Rad1 protein as a subunit od the 9-1-1 complex in the response to replication stress an DNA damage. 2019 ;[citado 2024 maio 21 ] -
Vancouver
Santos EV. Characterization of the Leishmania major Rad1 protein as a subunit od the 9-1-1 complex in the response to replication stress an DNA damage. 2019 ;[citado 2024 maio 21 ]
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