Efeito da inibição de TBX2 em carcinoma de células não pequenas de pulmão cultivadas em modelos BI- e tridimensionais (2021)
- Authors:
- Autor USP: ALVES, RENATA BISI - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMC
- DOI: 10.11606/D.42.2021.tde-21062023-110250
- Subjects: RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO; NEOPLASIAS PULMONARES; CÉLULAS CULTIVADAS DE TUMOR; FATORES DE TRANSCRIÇÃO; PROLIFERAÇÃO CELULAR; MICROSCOPIA DE FLUORESCÊNCIA; MICROSCOPIA ELETRÔNICA
- Keywords: Anoikis; Anóikis; Câncer de pulmão; Endoplasmic reticulum stress; Esferoides; Estresse do retículo endoplasmático; Lung cancer; Spheroids
- Language: Português
- Abstract: O fator de transcrição T-box2 (TBX2) é altamente expresso em tecidos fetais humanos pulmonares e possui um papel importante na organogênese dos pulmões. A superexpressão de TBX2 foi observada em diferentes tipos de câncer, promovendo proliferação, resistência a quimioterápicos, migração e invasão de células tumorais. O papel de TBX2 no câncer de pulmão, entretanto, ainda não é bem compreendido. Nesse estudo foi investigado o efeito do knockdown de TBX2 na proliferação, morfologia e formação de esferoides, da linhagem A549 de adenocarcinoma. O knockdown de TBX2 foi feito usando um plasmídeo de expressão shRNA alvo-específico. A proliferação das células com o knockdown e controles foi avaliada através dos ensaios de viabilidade celular, ciclo celular e índice mitótico. A formação de culturas 3D foi avaliada usando microscopia de luz, de contraste de fase, de fluorescência e eletrônica. Os resultados do ensaio de viabilidade celular, ciclo celular e índice mitótico não mostraram diferenças relevantes entre A549shTBX2 e os controles (A549 e A549shControl). Ocorreu um discreto aumento de células viáveis (2%), de células na fase S (5%) e do índice mitótico (3%) das células de A549shTBX2 em relação aos controles. Quanto à formação de esferoides, as micrografias de contraste de fase evidenciaram a incapacidade das células com knockdown de TBX2 de formar esferoides em relação aos controles, exibindo agregados celulares pouco compactos que se desagregaram já no 7°dia em cultura. FoiFoi feito ensaio de ciclo celular dos esferoides que mostrou um aumento notável do percentual de células em SubG0 de A549shTBX2 (26,02%) em relação aos controles, A549 (4,69%) e A549shControl (6,41%), ocorrendo concomitantemente diminuição do percentual de células nas fases S, G1 e G2/M do ciclo. Esses resultados foram confirmados pelas imagens de microscopia eletrônica, as quais mostraram a presença de células apoptóticas, necroptóticas, completa ausência de interações intracelulares e células com estresse do retículo endoplasmático. Indicando que o knockdown de TBX2 diminui a resistência à anoikis, provavelmente à causa do aumento da expressão de E-caderina, cujo gene é um alvo de repressão transcricional bem conhecido de TBX2
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- Data da defesa: 09.08.2021
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- Cor do Acesso Aberto: gold
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ABNT
ALVES, Renata Bisi. Efeito da inibição de TBX2 em carcinoma de células não pequenas de pulmão cultivadas em modelos BI- e tridimensionais. 2021. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-21062023-110250/. Acesso em: 23 maio 2024. -
APA
Alves, R. B. (2021). Efeito da inibição de TBX2 em carcinoma de células não pequenas de pulmão cultivadas em modelos BI- e tridimensionais (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-21062023-110250/ -
NLM
Alves RB. Efeito da inibição de TBX2 em carcinoma de células não pequenas de pulmão cultivadas em modelos BI- e tridimensionais [Internet]. 2021 ;[citado 2024 maio 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-21062023-110250/ -
Vancouver
Alves RB. Efeito da inibição de TBX2 em carcinoma de células não pequenas de pulmão cultivadas em modelos BI- e tridimensionais [Internet]. 2021 ;[citado 2024 maio 23 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-21062023-110250/
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.42.2021.tde-21062023-110250 (Fonte: oaDOI API)
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