Evaluation of gelatin methacryloyl hydrogels containing decellularized bovine bone matrix applied for dentin regeneration (2023)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, ISABELA SANCHES POMPEO DA - FOB
- Unidade: FOB
- Sigla do Departamento: BAD
- DOI: 10.11606/D.25.2023.tde-17012024-155854
- Subjects: ENGENHARIA TECIDUAL; REGENERAÇÃO TECIDUAL GUIADA; DENTINA REPARATIVA; GELATINA
- Keywords: Bone matrix; Dentin; Dentina; Engenharia tecidual; Gelatin; Gelatina; Hidrogéis; Hydrogels; Matriz óssea; Regeneração; Regeneration; Tissue engineering
- Agências de fomento:
- Language: Inglês
- Abstract: A busca por estratégias regenerativas minimamente invasivas que estimulem a formação de dentina reparadora a partir do estímulo às células pulpares residentes, tem sido estudada no campo da Odontologia Regenerativa. Neste estudo, foi proposta a incorporação de matrizes ósseas bovinas à gelatina metacrilada (GelMA), com a proposta de desenvolver um hidrogel biomimético fotopolimerizável para engenharia da dentina. Inicialmente, os parâmetros de fabricação do GelMA foram selecionados em ensaios dose-resposta, baseados no estudo da degradabilidade e viabilidade de células pulpares, sendo os hidrogéis fabricados com 15% de GelMA e 0,075% de fotoiniciador (LAP; Lithium Acylphosphinate), e fotoativados por 30s. Na sequência, foram produzidas micropartículas de tecido ósseo bovino submetido aos processos de descelularização (BMdc), onde o conteúdo celular foi removido, e de desproteinização (BMdp), onde todo conteúdo orgânico foi eliminado. A partir de um screening inicial, a concentração de 1% (p/v) de matriz óssea foi selecionada, por promover melhor interação celular. Assim, os seguintes grupos foram estabelecidos: GelMA-BMdc GelMA incorporado com 1% de BMdc; GelMA-BMdp - GelMA incorporado com 1% de BMdp; GelMA-nHA - GelMA incorporado com 1% de nano-hidroxiapatita; GelMA hidrogel sem incorporação (controle negativo). Os hidrogéis foram preparados, injetados e fotopolimerizados em placas de 96 compartimentos, sendo células pulpares humanas semeadas em sua estrutura. Os ensaios biológicos de viabilidade e proliferação celular (Live/Dead e Alamar Blue), e de diferenciação odontoblástica (Atividade de ALP e Alizarin Red) foram realizados. Os hidrogéis foram avaliados por microscopia eletrônica de varredura (MEV), para observação da arquitetura e avaliação da porosidade (ImageJ), e por espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), para avaliar a estrutura química. Além disso, foi realizado ensaiode degradabilidade com desafio enzimático. Os dados foram submetidos à análise pelos testes de ANOVA e Tukey (=5%). Células viáveis e proliferativas foram observadas em todos os grupos sem diferenças significativas. A incorporação das matrizes ósseas resultou em aumento significante da atividade de ALP e deposição de matriz mineralizada em comparação ao GelMA, sendo que o grupo GelMA-BMdc apresentou valores significativamente superiores a todos os demais grupos experimentais. Os espectros FTIR-ATR confirmaram a composição das matrizes ósseas e sua complexação à gelatina, bem como ligação química da BMdc à estrutura do GelMA. A incorporação das matrizes ósseas não alterou o padrão de degradabilidade do GelMA; no entanto, a BMdp e nHA alteraram o padrão de porosidade, gerando menores valores de diâmetro de poro em comparação ao GelMA puro. Este efeito não foi observado para o GelMA-BMdc. Assim, concluímos que a incorporação de matriz óssea bovina submetida à descelularização ao GelMA resultou em um hidrogel estável e poroso, com elevadabioatividade sobre células pulpares humanas, apresentando-se como uma alternativa de biomaterial passível de ser injetado e fotopolimerizado in situ em exposições pulpares visando a regeneração da dentina
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- Data da defesa: 28.09.2023
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- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
-
ABNT
SILVA, Isabela Sanches Pompeo da. Evaluation of gelatin methacryloyl hydrogels containing decellularized bovine bone matrix applied for dentin regeneration. 2023. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Bauru, 2023. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25148/tde-17012024-155854/. Acesso em: 20 maio 2024. -
APA
Silva, I. S. P. da. (2023). Evaluation of gelatin methacryloyl hydrogels containing decellularized bovine bone matrix applied for dentin regeneration (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Bauru. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25148/tde-17012024-155854/ -
NLM
Silva ISP da. Evaluation of gelatin methacryloyl hydrogels containing decellularized bovine bone matrix applied for dentin regeneration [Internet]. 2023 ;[citado 2024 maio 20 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25148/tde-17012024-155854/ -
Vancouver
Silva ISP da. Evaluation of gelatin methacryloyl hydrogels containing decellularized bovine bone matrix applied for dentin regeneration [Internet]. 2023 ;[citado 2024 maio 20 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25148/tde-17012024-155854/ - Avaliação de um scaffold de quitosana contendo hidróxido de cálcio em modelo de exposição pulpar simulada in vitro
- Synergistic potential of 1α,25-dihydroxyvitamin D3 and calcium–aluminate–chitosan scaffolds with dental pulp cells
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Informações sobre o DOI: 10.11606/D.25.2023.tde-17012024-155854 (Fonte: oaDOI API)
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