Padronização da técnica de dicroísmo circular para o estudo da estrutura da Na,K-ATPse: binômio estrutura-função (2003)
- Authors:
- Autor USP: RIGOS, CAROLINA FORTES - FFCLRP
- Unidade: FFCLRP
- Sigla do Departamento: 593
- Subjects: MEMBRANAS (BIOLOGIA); BIOQUÍMICA
- Language: Português
- Abstract: A Na,K-ATPase é uma proteína integral encontrada na membrana plasmática de praticamente todas as células animais, sendo responsável pelo transporte ativo de dois íons 'K POT.+' para o interior da célula e três íons 'Na POT.+' para o meio extracelular, processo ao qual é acoplada a hidrólise de uma molécula de ATP. Esta enzima é constituída de duas subunidades: uma subunidade catalítica, denominada 'alfa', com massa molecular de cerca de 110 kDa e uma subunidade 'beta' altamente glicosilada, de massa molecular aparente de 55 kDa. Alguns autores descrevem a forma protomérica ('alfa''beta') da Na,K-ATPase como sendo a forma funcionalmente ativa inserida na membrana; no entanto é descrito também que oligômeros de estrutura do tipo '('alfa''beta') IND.2' ou ainda de estrutura superior a esta, como '('alfa''beta') IND.4', possam ser a unidade funcional da enzima. Assim, o objetivo específico deste trabalho consistiu em padronizar a técnica de dicroísmo circular para coletar informações sobre a estrutura secundária da forma '('alfa''beta') IND.2' da Na,K-ATPase. A técnica de dicroísmo circular se baseia na absorção desigual da luz esquerdo e destro circularmente polarizada por moléculas que apresentam centros assimétricos. Assim, uma mudança na estrutura da proteína também reflete uma mudança na característica do seu espectro de dicroísmo. A análise conjunta dos resultados de CD e atividade da enzima mostra claramente que existe uma dependência entre aatividade e estrutura secundária da Na,K-ATPase. Processos de desnaturação empregando-se guanidina ou uréia, que induzem uma perda gradativa da estrutura em 'alfa'-hélice, ou ainda trifluoretanol, que provoca um aumento significativo da estrutura em 'alfa'-hélice da proteína, resultam na perda da atividade ATPase. Portanto, é mostrada a existência de uma única conformação estrutural da enzima que está correlacionada com uma habilidade ótima de hidrólise do ATP. .. O uso da técnica de CD também poderá trazer novas perspectivas para o estudo da formação de protômeros e como este processo pode modular a atividade da Na,K-ATPase
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2003
- Data da defesa: 08.08.2003
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ABNT
RIGOS, Carolina Fortes. Padronização da técnica de dicroísmo circular para o estudo da estrutura da Na,K-ATPse: binômio estrutura-função. 2003. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2003. . Acesso em: 26 abr. 2024. -
APA
Rigos, C. F. (2003). Padronização da técnica de dicroísmo circular para o estudo da estrutura da Na,K-ATPse: binômio estrutura-função (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Rigos CF. Padronização da técnica de dicroísmo circular para o estudo da estrutura da Na,K-ATPse: binômio estrutura-função. 2003 ;[citado 2024 abr. 26 ] -
Vancouver
Rigos CF. Padronização da técnica de dicroísmo circular para o estudo da estrutura da Na,K-ATPse: binômio estrutura-função. 2003 ;[citado 2024 abr. 26 ]
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