Isolamento de mutantes envolvidos na resposta a metais em Caulobacter crescentus (2003)
- Autores:
- Autor USP: MARQUES, MARILIS DO VALLE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Idioma: Português
- Resumo: Caulobacter crescentus é uma bactéria oligotrófica de vida livre que deve ser capaz de responder rapidamente a diversas condições ambientais, alterando o seu programa de expressão gênica. É uma bactéria passível de análise por metodologias genéticas muito abrangentes, tornando-se uma excelente candidata a um futuro uso como biosensor. Nosso objetivo principal é identificar e caracterizar quais os sistemas de metaloreguladores que são ativados em resposta aos metais de transição cádmio, ferro, cobre e zinco. Para tanto, uma identificação preliminar de genes homólogos aos genes dos operons czc (zinco) de Ralstonia e cop/pco (cobre) de Pseudomonas e E.coli, foi feita por meio da análise da similaridade da seqüência destes operons com o genoma de C.crescentus. Obtivemos os mutantes nulos dos genes czcA e pcoA pertencentes aos respectivos operons czc (zinco) e pco (cobre). Os mutantes foram obtidos através da inserção de um cassete de espectinomicina dentro da região codificadora destes genes, através de recombinação homóloga. Estas linhagens foram denominadas SP2009 (pcoA::Wspec) e SP2010 (czcA::Wspec), os quais não apresentam ainda um fenótipo claro, pois não mostraram diferenças na viabilidade na presença dos metais cobre (SP2009) e zinco (SP2010). Foi realizada a construção de uma biblioteca de 5700 mutantes por inserção do transposon miniTn5lac carregado por um plasmídeo suicida pUTKm1, contendo o gene repórter lacZ sem promotor. Em uma primeira seleção foi obtido oisolamento de mutantes da biblioteca que apresentaram crescimento deficiente ou lacZ induzido na presença de 30 mM de cádmio e/ou 100 mM de ferro. Estes mutantes isolados sofreram uma nova seleção na presença de 20 mM de cádmio e 80 mM de ferro. Os mutantes que se mostraram mais sensíveis ou que apresentaram o lacZ mais induzido pelos metais estão tendo os genes interrompidos identificados, através de PCR e sequenciamento de DNA. Até o momento foram identificados os genes de três mutantes: 58F5 Regulador de transcrição BlaI; 06A1 Regulador de transcrição LysR e 14E5 GTP binding protein
- Imprenta:
- Editora: Sociedade Brasileira de Microbiologia
- Data de publicação: 2003
- Nome do evento: Congresso Brasileiro de microbiologia
-
ABNT
BRAZ, V. S. e MARQUES, Marilis do Valle. Isolamento de mutantes envolvidos na resposta a metais em Caulobacter crescentus. 2003, Anais.. [S.l.]: Sociedade Brasileira de Microbiologia, 2003. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Braz, V. S., & Marques, M. do V. (2003). Isolamento de mutantes envolvidos na resposta a metais em Caulobacter crescentus. In . Sociedade Brasileira de Microbiologia. -
NLM
Braz VS, Marques M do V. Isolamento de mutantes envolvidos na resposta a metais em Caulobacter crescentus. 2003 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Braz VS, Marques M do V. Isolamento de mutantes envolvidos na resposta a metais em Caulobacter crescentus. 2003 ;[citado 2024 abr. 19 ] - Estudo da participação da proteína Rho na regulação do estresse oxidativo mediado por KatG em Caulobacter crescentus
- Estudo da participação da proteína rho na regulação do estresse oxidativo mediado por KatG em Caulobacter crescentus
- Análise da expressão de metareguladores envolvidos na resposta a metais de Caulobacter crescentus
- Identificação de mutantes selecionados para resposta a metais em Caulobacter crescentus
- Estudo da autoregulação do fator de terminação de transcrição Rho de Caulobacter crescentus
- Caracterização do operon "PEP" em "Caulobacter crescentus"
- Isolamento, caracterizacao e expressao do gene da subunidade regulatoria da proteina quinase dependente de amp ciclico em blastocladiella emersonii
- Isolation and characterization of Caulobacter mutants impaired in adaptation to stationary phase
- CztR, a LysR-Type transcription regulator involved in zinc homeostasis and oxidative stress defense in Caulobacter crescentus
- Papel de um regulador de transcrição da família BlaI na resposta a estresse oxidativo em Caulobacter crescentus
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