Quantificação de ceramida em músculo cardíaco de ratos por cromatografia líquida de alto desempenho acoplado à espectrometria de massas (2008)
- Authors:
- Autor USP: NUCCI, GILBERTO DE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: FARMACOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Ceramidas são uma família de moléculas lipídicas, formadas por esfingosina e ácido graxo. Estão presentes em grandes concentrações na membrana celular e estão associadas à diferenciação, proliferação, morte celular programada e apoptose das células. Objetivos: determinação de ceramida (C16) em músculo cardíaco de ratos usando C17, como padrão interno. Método e Resultados: Método analítico baseado em cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em modo de detecção negativo foi desenvolvido para determinação de ceramida (C16) em músculo cardíaco de ratos usando C17, como padrão interno. O analito e padrão interno (PI) foram extraídos do músculo cardíaco utilizando aproximadamente 0.1g do tecido cardíaco previamente triturado. Em seguida, 200 uL de C17 ceramida 1ug/mL foi adicionado e vortex 30 seg. Após, 50 uL de NH4OH 50% (vortex 30 seg), mais 4 mL de hexano (vortex 1 min). As amostras foram centrifugadas por 5 minutos a 3500 rpm. Em seguida, a fase orgânica foi transferida para novos tubos, evaporada e o resíduo ressuspendido em 0.4 mL de metanol. Coluna de sílica de 3 µm - 100 mm x 21 mm. A fase móvel foi constituída de metanol/hexano (95/5 v/v) + 10mM NH4OH. O método cromatográfico teve um tempo total de corrida de 3.0 min e curva de calibração quadrática (50 - 10000 ng/mL). A detecção foi realizada por espectrômetro de massa QUATRO LC (Micromass, UK) em monitoramento de reação múltipla (MRM). A precisão e acurácia calculados para o limite dequantificação (LIQ) foram 8.16% e 100.4, respectivamente. Conclusão: O método apresentou precisão, acurácia, especificidade e sensibilidade para a quantificação de ceramida em músculo cardíaco do ventrículo esquerdo de ratos.
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2008
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
-
ABNT
MENDES, G. et al. Quantificação de ceramida em músculo cardíaco de ratos por cromatografia líquida de alto desempenho acoplado à espectrometria de massas. 2008, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2008. . Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Mendes, G., Sucupira, M., Iglesias, F., & De Nucci, G. (2008). Quantificação de ceramida em músculo cardíaco de ratos por cromatografia líquida de alto desempenho acoplado à espectrometria de massas. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Mendes G, Sucupira M, Iglesias F, De Nucci G. Quantificação de ceramida em músculo cardíaco de ratos por cromatografia líquida de alto desempenho acoplado à espectrometria de massas. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Mendes G, Sucupira M, Iglesias F, De Nucci G. Quantificação de ceramida em músculo cardíaco de ratos por cromatografia líquida de alto desempenho acoplado à espectrometria de massas. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 23 ] - Presence of nitric oxide synthase inhibitor activity in rat pleural exsudates
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