Detecção da mutação BRAF em carcinoma papilífero de tiroide comparado por SSCP e PCR nested (2009)
- Authors:
- Autor USP: KIMURA, EDNA TERUKO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A mutação do gene BRAFT1799A é a alteração genética mais frequente em carcinoma papilífero de tiroide (CPT). Pelo fato de estar associada ao pior prognóstico clínico, é importante estabelecermos métodos simples e robusto que determinem essa mutação. Neste estudo comparamos duas metodologias de detecção da mutação BRAFT1799A em tecido tumoral de CPT emblocado em parafina. Extraímos DNA de blocos histológicos de 102 pacientes com diagnóstico de CPT e analisamos a mutação BRAF pelos métodos SSCP e PCR-nested. No SSCP, o segmento do éxon 15 do gene BRAF foi amplificado por PCR (231pb), desnaturado com NaOH a 95°C, aplicado em gel MDE 0,6%. Após a coloração com nitrato de prata, analisamos a migração das bandas baseadas em um controle positivo. No PCR-nested, o DNA foi amplificado em duas reações de PCR sucessivas na região que contém o sítio de mutação BRAFT1799A; digerido com XbaI e o produto observado em gel SDS-PAGE 12%. Dos 102 pacientes, o SSCP identificou 34/102 (33%) com mutação BRAFT1799A e o PCR-nested 43/102 (42%). Observamos que 68/102 pacientes negativos para mutação por SSCP, 21/68 foram identificados como positivos por PCR-nested; por outro lado, 4/34 mutação positiva por SSCP não foi detectado por PCRnested. Considerando, o SSCP como "gold standard", PCR-nested apresenta sensibilidade de 90% e especificidade de 74%; enquanto PCR-nested "gold standard", o SSCP apresenta sensibilidade de 61% e especificidade 93%. Conclusão: O PCR-nestedapresentou alta sensibilidade, podendo ser útil para determinar a mutação BRAF na prática clínica de pacientes com CPT.
- Imprenta:
- Source:
- Título do periódico: Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 53, suppl. 2, 2009
- Conference titles: Latin American Thyroid Congress - LATS 2009
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ABNT
DA SILVA, M. J. et al. Detecção da mutação BRAF em carcinoma papilífero de tiroide comparado por SSCP e PCR nested. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. Gramado: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. . Acesso em: 23 abr. 2024. , 2009 -
APA
Da Silva, M. J., Fuziwara, C. S., Kulcsar, M. A., Friguglietti, C. U., Araujo-Filho, V. J. F., Yoon, H. S., et al. (2009). Detecção da mutação BRAF em carcinoma papilífero de tiroide comparado por SSCP e PCR nested. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. Gramado: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. -
NLM
Da Silva MJ, Fuziwara CS, Kulcsar MA, Friguglietti CU, Araujo-Filho VJF, Yoon HS, Logullo AF, Kimura ET. Detecção da mutação BRAF em carcinoma papilífero de tiroide comparado por SSCP e PCR nested. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. 2009 ; 53[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Da Silva MJ, Fuziwara CS, Kulcsar MA, Friguglietti CU, Araujo-Filho VJF, Yoon HS, Logullo AF, Kimura ET. Detecção da mutação BRAF em carcinoma papilífero de tiroide comparado por SSCP e PCR nested. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia. 2009 ; 53[citado 2024 abr. 23 ] - Mutação de BRAF em câncer de tiróide
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