Produção de uma vacina de DNA para as proteínas prM e E do vírus dengue-1 utilizando pV AX® como vetor de expressão (2009)
- Authors:
- Autor USP: PEREIRA, MAIRA GABRIELA MARTINS - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: DENGUE; DNA; VACINAS VIRAIS; IMUNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Os vírus da dengue (DENV) correspondem a mais importante doença viral veiculada por artrópodes de significância para a saúde pública e consistem de quatro tipos antigênicos diferentes (DENV-1 ao -4) que apresentam grande diversidade genética. Estes vírus usualmente causam desde dengue clássica (DC) até febre hemorrágica (FHD) e síndrome de choque por dengue (SCD). O vírus é transmitido ao homem através da picada dos mosquitos Aedes ssp. fêmea, principalmente Aedes aegypti. O dengue é um vírus de RNA de fita simples de polaridade positiva que pertence à família Flaviviridae e ao gênero Flavivirus. O RNA é envolto por um envelope lipídico no qual a proteína de membrana (M) e a glicoproteína do envelope (E) estão fixadas. A proteína E é o principal alvo de anticorpos neutralizantes desempenhando um papel importante na ligação ao receptor e na fusão de membrana, conseqüentemente, esta tem sido a proteína estrutural mais importante no emprego de candidatos a vacinas. Até o momento, não existe tratamento específico para dengue nem vacina comercial disponível, de forma que o controle do vetor tem sido a única alternativa para o controle da doença. O sucesso na construção de uma vacina para dengue consiste na elaboração de uma vacina tetravalente que seja capaz de induzir produção de anticorpos neutralizantes contra todos os quatro sorotipos, diminuindo a possibilidade de desenvolvimento das formas mais graves da doença. O uso de vacinas de DNA é uma nova e promissoratécnica de imunização e nosso grupo tem desenvolvido vacinas de DNA para os quatro sorotipos. As vacinas produzidas por engenharia genética são potencialmente mais seguras, menos termolábeis e mais facilmente administráveis. Além disso, a produção em massa destas vacinas resultará em redução no custo, tratando-se de uma grande vantagem econômica, considerando que a grande proporção da população afetada pelo dengue, e que se benificiaria com o uso destas vacinas, reside em países em desenvolvimento. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi a produção de uma vacina de DNA para as proteínas prM e E do vírus dengue-1 utilizando p VAX como vetor de expressão. O vetor p VAX foi escolhido para a construção da vacina por ser o único plasmídeo aceito para uso em humanos pela FDA. No nosso trabalho foram desenvolvidos clones recombinantes para o vírus dengue-1 que foram capazes de expressar as proteínas virais em células Hek. A detecção das proteínas virais foi feita por imunofluorescência indireta e imunoprecipitação seguida de eletroforese em gel (SDS-PAGE) de células tranfectadas com os clones. O clone que melhor expressou as proteínas prM e E (pVAX-D1c104) do vírus dengue-1 foi selecionado para avaliação da sua imunogenicidade e conseqüente proteção em camundongos Balb/c. A detecção de anticorpos específicos no soro dos animais imunizados foi realizada pela técnica de imunofluorescência indireta e a proteção da vacina foi avaliada pelo ensaio desobrevivência após desafio i.c. com o DENV-1. Como resultado, a vacina pVAX-D1c104 foi capaz de induzir produção de anticorpos específicos contra o vírus porém não conferiu proteção após desafio. Acreditamos, dessa forma, que esta vacina necessita de melhorias, para então servir de possível candidata à vacina tetravalente para o vírus dengue. No Brasil, o gerenciamento inadequado do plano de erradicação do Aedes aegypti em algumas localidades resultou no desenvolvimento de surtos epidêmicos, e o desenvolvimento de uma vacina para os vírus da dengue seria de imensa valia, pois é a forma mais barata e mais eficaz de todas as intervenções médicas modernas
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2009
- Data da defesa: 13.10.2009
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ABNT
PEREIRA, Maira Gabriela Martins. Produção de uma vacina de DNA para as proteínas prM e E do vírus dengue-1 utilizando pV AX® como vetor de expressão. 2009. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2009. . Acesso em: 17 abr. 2024. -
APA
Pereira, M. G. M. (2009). Produção de uma vacina de DNA para as proteínas prM e E do vírus dengue-1 utilizando pV AX® como vetor de expressão (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Pereira MGM. Produção de uma vacina de DNA para as proteínas prM e E do vírus dengue-1 utilizando pV AX® como vetor de expressão. 2009 ;[citado 2024 abr. 17 ] -
Vancouver
Pereira MGM. Produção de uma vacina de DNA para as proteínas prM e E do vírus dengue-1 utilizando pV AX® como vetor de expressão. 2009 ;[citado 2024 abr. 17 ]
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