Expressão do fator estimulador de colônia de granulócito humano recombinante (rhG-CSF) em Escherichia coli (2010)
- Authors:
- Autor USP: GOMES, FERNANDA RESENDE - BIOTECNOL
- Unidade: BIOTECNOL
- Subjects: ESCHERICHIA COLI; GRANULÓCITOS (HUMANO); FATORES BIOLÓGICOS; GRANULÓCITOS CITOPLASMÁTICOS; GENÉTICA BACTERIANA
- Language: Português
- Abstract: O Fator Estimulador de Colônias de Granulócitos humano recombinante (rhG-CSF) produzido em Escherichia coli é uma proteína não glicosilada com 175 aminoácidos, de grande importância clínica para o tratamento de neutropenias. O presente trabalho propõe a construção de dois sistemas de expressão em E. coli, um sistema para obtenção do rhG-CSF no citoplasma e outro para secreção da proteína recombinante no meio de cultura utilizando a sequência sinal da L-asparaginase II. Os dois sistemas de expressão foram testados e comparados. A partir desses dados, passou-se para as etapas de obtenção do rhG-CSF com o sistema de expressão sem a sequência sinal. As etapas de renaturação e purificação foram eficientes obtendo-se uma proteína com adequado grau de pureza, integridade estrutural e atividade biológica. Essa proteína também foi utilizada com sucesso para a produção de anticorpos policlonais em camundongos. Com os resultados obtidos, a proteína rhG-CSF mostrou-se viável para estudos posteriores em bioreatores e produção em escala-piloto
- Imprenta:
- Data da defesa: 22.06.2010
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ABNT
GOMES, Fernanda Resende. Expressão do fator estimulador de colônia de granulócito humano recombinante (rhG-CSF) em Escherichia coli. 2010. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2010. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-13082010-163827/. Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Gomes, F. R. (2010). Expressão do fator estimulador de colônia de granulócito humano recombinante (rhG-CSF) em Escherichia coli (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-13082010-163827/ -
NLM
Gomes FR. Expressão do fator estimulador de colônia de granulócito humano recombinante (rhG-CSF) em Escherichia coli [Internet]. 2010 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-13082010-163827/ -
Vancouver
Gomes FR. Expressão do fator estimulador de colônia de granulócito humano recombinante (rhG-CSF) em Escherichia coli [Internet]. 2010 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-13082010-163827/
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