Tese

Identificação, reconstituição lipossomal e caracterização funcional de uma proteína desacopladora do fungo filamentoso Aspergillus fumigatus (2015)

• Authors:
  • Cardoso, Fernanda Gomes
  • Uyemura, Sérgio Akira (Orientador)
• Autor USP: CARDOSO, FERNANDA GOMES - FMRP
• Unidade: FMRP
• Sigla do Departamento: RBI
• Subjects: ASPERGILLUS; MITOCÔNDRIAS; PROTEÍNAS
• Language: Português
• Abstract: Aspergillus fumigatus é um importante patógeno oportunista causador de infecções invasivas em hospedeiros imunocomprometidos. Estudos de respiração mitocondrial sugeriram a presença de componentes alternativos em sua cadeia respiratória, como a proteína desacopladora (UCP), os quais podem estar envolvidos com processos de adaptação desses microrganismos a ambientes adversos. As UCPs são membros da família de proteínas mitocondriais transportadoras de ânions, as quais são ativadas por ácidos graxos e sensíveis a nucleotídeos de purina. Essas proteínas dissipam o gradiente eletroquímico de prótons gerado pela cadeia transportadora de elétrons durante a respiração mitocondrial. Apesar das evidências funcionais, atualmente, pouco se sabe a respeito das sequências gênicas codificantes dessas proteínas em eucariotos inferiores. Neste trabalho, as sequências codificantes de três transportadores mitocondriais, AfDC (transportador de dicarboxilato), AfOAC (transportador de oxaloacetato) e AfUCP (potencial proteína desacopladora), foram clonadas, expressas em Escherichia coli e funcionalmente reconstituídas em sistemas lipossomais, a fim de se avaliar o transporte de prótons. Os proteolipossomos contendo AfUCP e AfOAC (mas não AfDC) foram capazes de transportar H+ após indução com ácido linoleico. A adição de ATP (um nucleotídeo de purina) inibiu o efluxo de H+ apenas em proteolipossomos contendo AfUCP, o que caracteriza uma atividade típica de UCP. Uma vez identificado o gene codificante da UCP em A. fumigatus, a fim de se estudar seu papel funcional in vivo, foi realizada a deleção desse gene e verificada as alterações funcionais e fenotípicas da linhagem mutante Δucp. A avaliação do potencial de membrana mitocondrial mostrou que, diferentemente da cepa controle, em esferoplastos do mutante Δucp não houve uma diminuição do potencial induzida por ácido linoleicoAlém disso, este trabalho relata, pela primeira vez, a identificação e caracterização funcional de uma proteína desacopladora de um fungo filamentoso
• Imprenta:
  • Publisher place: Ribeirão Preto
  • Date published: 2015
• Data da defesa: 02.10.2015

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• ABNT

  CARDOSO, Fernanda Gomes. Identificação, reconstituição lipossomal e caracterização funcional de uma proteína desacopladora do fungo filamentoso Aspergillus fumigatus. 2015. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2015. . Acesso em: 15 maio 2024.

• APA

  Cardoso, F. G. (2015). Identificação, reconstituição lipossomal e caracterização funcional de uma proteína desacopladora do fungo filamentoso Aspergillus fumigatus (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.

• NLM

  Cardoso FG. Identificação, reconstituição lipossomal e caracterização funcional de uma proteína desacopladora do fungo filamentoso Aspergillus fumigatus. 2015 ;[citado 2024 maio 15 ]

• Vancouver

  Cardoso FG. Identificação, reconstituição lipossomal e caracterização funcional de uma proteína desacopladora do fungo filamentoso Aspergillus fumigatus. 2015 ;[citado 2024 maio 15 ]

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