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Clonagem, seqüência e caracterização de um cDNA que codifica para endoplasmina em Schistosoma mansoni (2000)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: KAGEYAMA, PAULA AZEVEDO - FMRP
  • USP Schools: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBQ
  • Subjects: BIOQUÍMICA
  • Language: Português
  • Abstract: A clonagem e caracterização de novos genes em Schistosoma mansoni contribuem de maneira relevante para um maior esclarecimento de sua biologia, gerando informações relativas a sua morfologia, fisiologia, bioquímica e relações com o hospedeiro.Assim, dentro deste contexto, uma biblioteca de cDNA construída no vetor Lambda ZAPII foi rastreada com um cDNA gentilmente cedido pela Prof Dra. Glória Franco (UFMG) a diversos clones foram isolados de 2 x 107 clones. Dentre estes, um clone foiselecionado para o seqüenciamento. Seu mapa de restrição apresentou sítios ínternos para as endonucleases de restrição EcoR I, Pst I e Xba I, os quais foram utilizados para subclonar fragmentos menores de cerca de 1500 pb (EcoR Uba 1) e 1000pb(Pst Uba I), a fim de possibilitar o seqüenciamento completo do cDNA nas duas orientações com os iniciadores ("primers") universal e reverso, utilizando os métodos de seqüenciamento manual e automático. Além das subclonagens, também foinecessária a construção de um "primer" para finalizar o seqüenciamento. Dessa forma, o cDNA foi completamente seqüenciado, apresentando um tamanho de 2602 pb. Análises computacionais da seqüência completa de nucleotídeos identificaram um códigode leitura aberto (ORF) e junções de éxons. A seqüência predita de aminoácidos mostrou uma homologia muito alta com endoplasmático de células nucleadas, que também pode ser denominada de HSP100, GRP94 ou ERp99. Foram detectados na seqüência trêsmotivosconservados característicos de endoplasminas: o da da família HSP90, o de retenção no retículo endoplasmático e um sítio de ligação para ATP/GTP. A massa molecular estimada da proteína é de 90,5 KDa e a seqüência deste cDNA estádepositada no GenBank sob o número de acesso AF217404. Análises de Sourthern-blot permitiram sugerir que este gene apresenta uma única cópia no genoma do S. mansoni
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 28.02.2000

  • Exemplares físicos disponíveis nas Bibliotecas da USP
    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    FMRP11200059345kageyama, Paula Azevedo
    How to cite
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    • ABNT

      KAGEYAMA, Paula Azevedo; RODRIGUES, Vanderlei. Clonagem, seqüência e caracterização de um cDNA que codifica para endoplasmina em Schistosoma mansoni. 2000.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2000.
    • APA

      Kageyama, P. A., & Rodrigues, V. (2000). Clonagem, seqüência e caracterização de um cDNA que codifica para endoplasmina em Schistosoma mansoni. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Kageyama PA, Rodrigues V. Clonagem, seqüência e caracterização de um cDNA que codifica para endoplasmina em Schistosoma mansoni. 2000 ;
    • Vancouver

      Kageyama PA, Rodrigues V. Clonagem, seqüência e caracterização de um cDNA que codifica para endoplasmina em Schistosoma mansoni. 2000 ;

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