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Tese

Interações entre DNA e vesículas catiônicas (2000)

  • Authors:
  • Autor USP: KIKUCHI, IRENE SATIKO - IQ
  • Unidade: IQ
  • Sigla do Departamento: QBQ
  • Subjects: BIOQUÍMICA; BIOLOGIA MOLECULAR
  • Language: Português
  • Abstract: Neste trabalho foram analisadas sob o ponto de vista físico-químico, as interações entre DNA e lipossomos catiônicos de brometo de dioctadecildimetilamônio (DODAB). Foram utilizados os seguintes modelos: 1) 2'-desoxiadenosina 5'-monofosfato (DMP),um modelo de unidade monomérica do polímero que é o DNA-1; 2) DNAs de bacteriófagos T2, T4, T5, T7 e 'PI' 3) vesículas pequenas de DODAB preparadas por sonicação; 4) vesículas grandes de DODAB preparadas por aquecimento ('56 GRAUS'C/30 minutos) ou vaporização clorofórmica interação entre 2'-desoxiadenosina 5'-monofosfato (DMP) e lipossomos de DODAB resultou em adsorção máxima de DMP ao lipossomo catiônico com uma proporção molar DODAB: DMP de 2:1 e mobilidade eletroforética (ME) mínima mas positiva dos lipossomos. Em força iônica de 5 mM, a adsorção máxima de DMP sobre os lipossomos aproxima-se de zero, mostrando que a formação do complexo DODAB/DMP é essencialmente dirigida pela atração eletrostática. A adição de nucleotídeo na faixa de milimolar (0,4 - 1,5 mM) induz a umm aumento de turbidez da dispersão de lipossomos (DODAB 0,08 mM) em função do tempo. Ocorrem velocidades de floculação muito maiores que as obtidas por adição de NaCl (40-120 mM). O nucleótide comporta-se como um ânion hidrofóbico com uma afinidade pela membrana muito maior que a exibida por um ânion simples como o cloreto DMP induz ruptura dos lipossomos contendo ['ANTPOT. 14 C'] sacarose, sugerindo quea interação DMP/bicamada não é superficial. Embora ainteração preserve a carga positiva do lipossomo, a integridade lipossomal não é preservada. Na adsorção máxima, a inserção de DMP na bicamada é a explicação mais razoável para manutenção dacarga positiva da vesícula, proporção molar DADOB : DMP de 2:1 e extravasamento de conteúdo interno lipossomal. A interação DODAB/DNA também é dirigida por atração eletrostática entre o DNA e a bicamada catiônica. Marcadores incorporados ao DNA ou a sítios de ) bicamada são deslocados para a água devido à interação. Sob condições de excesso de DODAB, na situação de adsorção máxima de DODAB sobre DNA, existem cerca de 70 moléculas de DODAB por nucleotide de DNA e esta proporção não depende do tipo de DNA. A interação DODAB/DNA leva à formação de glóbulos visíveis por microscopia óptica de campo escuro e ocorrência de uma dependência linear entre turbidex e 1/'PI POT. 2', onde 'PI' é o comprimento de onda da luzincidente. Na condição de adsorção máxima de DODAB, a formação de complexos globulares DODAB/DNA causa perda de hipocromismo da dupla fita de DNA conforma detectado por efeitos de temperatura sobre absorbância em 260 nm de misturas DNA/DODAB. Em suma interação de DODAB/DNA não é superficial: o lipossomo perde sua integridade e o DNA perde sua estrutura em dupla hélice, tornando-se fita simples. A atração hidrofóbica entre bases nitrogenadas de DNA e cadeias hidrocarbônicas dos lipídios catiônicos tem papel importante na determinação da estrutura do complexo
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 24.11.2000
    • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      KIKUCHI, Irene Satiko. Interações entre DNA e vesículas catiônicas. 2000. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2000. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-091928/. Acesso em: 24 abr. 2024.

    • APA

      Kikuchi, I. S. (2000). Interações entre DNA e vesículas catiônicas (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-091928/

    • NLM

      Kikuchi IS. Interações entre DNA e vesículas catiônicas [Internet]. 2000 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-091928/

    • Vancouver

      Kikuchi IS. Interações entre DNA e vesículas catiônicas [Internet]. 2000 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-31052019-091928/

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