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Sistema de eletroforese capilar com detecção UV e espectrometria de massas com fonte de plasma acoplado indutivamente (ICP-MS) para análise de metalotioneínas (2002)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: LAVORANTE, ANDRÉ FERNANDO - CENA
  • USP Schools: CENA
  • Subjects: ELETROFORESE; ESPECTROMETRIA DE MASSAS
  • Language: Português
  • Abstract: Nessa pesquisa, propõe-se a implementação de um sistema de eletroforese capilar de zona (CZE) para separação e identificação de isoformas metalotioneínas (MT). Para a separação de isoformas de metalotioneína, MTI e MTII, em amostras de fígado de coelho e rim de cavalo por CZE, foi utilizado um equipamento comercial com detecção UV em 200 nm. Com esse sistema, foram avaliadas a influência da concentração, do pH da solução eletrolítica e a diferença de potencial (ddp). A separação das isoformas de MT foi obtida após 3 minutos empregando um capilar de sílica fundida de 75 um d.i., solução eletrolítica 50 mmol 'L POT. -1' Tris-HCI em pH 9,0 e ddp de 30 kV. O limite de detecção para as isoformas foi de 10 ug m'L POT. -1'. Posteriormente, apresenta-se o desenvolvimento de um sistema de eletroforese capilar composto de uma fonte de alta voltagem de até 30 kV e respectivos eletrodos, detector UV especifico para detecção em fluxo e capilar de sílica fundida. Aplicando-se as condições estabelecidas na eletroforese comercial, o sistema montado foi eficiente para a separação das isoformas de MT, com precisão caracterizada por desvio padrão relativo menor que 3%. Após a otimização dos parâmetros envolvidos no sistema CZE, o acoplamento com ICP-MS para detecção de Cd e Zn. Para isso, foi construído um dispositivo cuja geometria permitiu a introdução adequada do capilar eletroforético no nebulizador pneumático concêntrico e micro-concêntrico, como também doeletrodo de platina e da solução eletrolítica auxiliar. O efeito de sucção do nebulizador foi minimizado pela adição de um fluxo auxiliar, permitindo a separação das espécies. Os sinais transientes foram monitorados nos isótopo 114 Cd e 66Zn para identificar a presença de Cd e Zn nas isoformas de MT. A detecção de Cd e Zn foi observada após 7 minutos aplicando-se ddp de 15 kV, utilizando o nebulizador pneumático concêntrico. ) A sensibilidade método foi afetada devido à diluição ocorrida na interface pela vazão da solução auxiliar de 2,0 mL 'min POT. -1'. A vazão da solução eletrolítica foi diminuída para 75 uL 'min POT. -1' quando utilizando o nebulizador pneumático micro-concêntrico. A sensibilidade do método proposto é aproximadamente 20 vezes maior do que aquela obtida com pneumático concêntrico
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 15.02.2002

  • Exemplares físicos disponíveis nas Bibliotecas da USP
    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    CENA12800000209(043) L414s 9837
    How to cite
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    • ABNT

      LAVORANTE, André Fernando; GINÉ-ROSIAS, Maria Fernanda Georgina. Sistema de eletroforese capilar com detecção UV e espectrometria de massas com fonte de plasma acoplado indutivamente (ICP-MS) para análise de metalotioneínas. 2002.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2002.
    • APA

      Lavorante, A. F., & Giné-Rosias, M. F. G. (2002). Sistema de eletroforese capilar com detecção UV e espectrometria de massas com fonte de plasma acoplado indutivamente (ICP-MS) para análise de metalotioneínas. Universidade de São Paulo, Piracicaba.
    • NLM

      Lavorante AF, Giné-Rosias MFG. Sistema de eletroforese capilar com detecção UV e espectrometria de massas com fonte de plasma acoplado indutivamente (ICP-MS) para análise de metalotioneínas. 2002 ;
    • Vancouver

      Lavorante AF, Giné-Rosias MFG. Sistema de eletroforese capilar com detecção UV e espectrometria de massas com fonte de plasma acoplado indutivamente (ICP-MS) para análise de metalotioneínas. 2002 ;