Análise da expressão e distribuição subcelular da cadeia leve de dineína de 8 kDa na mitose e diferenciação em linhagens celulares melanoma e HeLa (2002)
- Authors:
- Autor USP: PATUSSI, ELIANA VALÉRIA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Assunto: BIOLOGIA CELULAR
- Language: Português
- Abstract: A cadeia leve de dineína de 8kDa (DLC) está emergindo como uma família de proteínas multifuncionais, altamente conservadas. Elas são encontradas em associação à dineína e à miosina-Va, além de ineragir com diversas outras proteínas celulares, tais como, a sintase do óxido nítrico neuronal (nNOS), IkBa, proteínas pró-apoptóticas da família da BcL2 (Bim e Bmf) e uma proteína do capsídeo viral; além do mRNA do hormônio paratiroideano. Nesse trabalho, subcionamos o cDNA da cadeia leve de dineína humana, DLC1, em fusão com a proteína fluorescente verde (GFP). A proteína recombinante (GFP-DLC1), expressa transitoriamente em células B16-F10 e HEK-293, apresentou o peso molecular esperado em SDS-PAGE e foi reconhecida pelos anticorpos contra a DLC1 ou a GFP.Os resultados obtidos, da análise em células epiteliais de carcinoma cervical (HeLa), e dos melanomas B16-F10 (MYO5a++) e S91-6 (mutante no gene MYO5a), demonstraram que tanto a DLC endógena como a GFP-DLC1, localizam-se predominantemente na região perinuclear, inclusive centrossomo, em células interfásicas. Em células em divisão, a DLC é intensamente recrutada para os pólos e fibras de fuso e cinetocoros. Esse padrão de localização é indistinguível entre as células mutantes e não mutantes no gene MYO5a, portanto, sugerindo que a DLC1 esteja essencialmente associada à dineína e não à miosina Va nessas células. Os dados indicam que a DLC1 exibe uma redistribuição dinâmica na progressão mitótica e que a GFP-DLC1 éfuncional, sendo que sua expressão na célular permite observar a dinâmica do fuso mitótico sob vídeo microscopia de fluorescência
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2002
- Data da defesa: 08.02.2002
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ABNT
PATUSSI, Eliana Valéria. Análise da expressão e distribuição subcelular da cadeia leve de dineína de 8 kDa na mitose e diferenciação em linhagens celulares melanoma e HeLa. 2002. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2002. . Acesso em: 18 abr. 2024. -
APA
Patussi, E. V. (2002). Análise da expressão e distribuição subcelular da cadeia leve de dineína de 8 kDa na mitose e diferenciação em linhagens celulares melanoma e HeLa (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Patussi EV. Análise da expressão e distribuição subcelular da cadeia leve de dineína de 8 kDa na mitose e diferenciação em linhagens celulares melanoma e HeLa. 2002 ;[citado 2024 abr. 18 ] -
Vancouver
Patussi EV. Análise da expressão e distribuição subcelular da cadeia leve de dineína de 8 kDa na mitose e diferenciação em linhagens celulares melanoma e HeLa. 2002 ;[citado 2024 abr. 18 ]
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