Regulação de volume em células de melanoma murino, linhagem S-91: aumento regulatório de volume (RVI) (2002)
- Authors:
- Autor USP: MACFADEM, SILVIA REGINA MENDES - IB
- Unidade: IB
- Sigla do Departamento: BIF
- Subjects: METABOLISMO CELULAR; MEMBRANA PLASMÁTICA; FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Este trabalho teve como objetivo avaliar o comportamento das células de melanoma murino, linhagem S-91, frente a choques hipertônicos agudos, e assim, verificar a capacidade de aumento regulatório de volume (regulatory volume increase - RVI) particularmente no que diz respeito à participação de transportadores transmembranais: cotransporte 'NA POT.+'-'K POT.+'-'2CL POT.-', troczdores acoplados 'NA POT.+'/'H POT.+' e 'CL POT.-'/'HCO IND.3' e da bomba 'NA POT.+'-'K POT.+'-ATPase. Para tanto, as células foram mantidas em cultura de monocamada em meio F-10 de Ham, suplementado com 10% de soro fetal bovino, sendo posteriormente soltas com Tyrode e alíquotas foram transferidas para um disco de cultura. Nos experimentos para determinação da participação das vias de transportes transmembranais em solução controle, as células foram superperfundidas com solução isotônica 290mOsm/kg'H IND.2'O acrescida dos inibidores destas vias, isto é, bumetanide 10'mü'M (contransporte 'NA POT.+'-'K POT.+'-2CL POT.-), 2,2'-ácido dissulfídrico 4,4'-diisotiocianatostilbeno 200'mü'M (DIDS para o trocador 'CL POT.-'/'HCO IND.3 POT.-') e ouabaína 1mM (bomba 'NA POT.+'-'K POT.+'-ATPase). A fim de se caracterizar a respostas destas células a choques anisosmóticos agudas, as mesmas foram submetidas a superfusão em soluções hipertônicas obtidas pela adição de Sacarose e de NaCl. Para determinar a participação de transportadores e da bomba 'NA POT.+'-'K POT.+'-ATPase na RVI, as célulasforam superfundidas com solução hipertônica 350mOsm/kg'H IND.2 O' acrescida dos inibidores destas vias, ou seja, bumetanide 10'mü'M (HMA para o trocador 'NA POT.+'/'H POT.+', 2,2'-ácido dissulfídrico 4,4'-diisotiocianatostilbeno 200'mü'M (DIDS para o trocador 'Cl POT.-/'HCO IND.3 POT.-') e ouabaína 1mM (bomba 'Na POT.+'-'K POT.+'-ATPase). As imagens foram monitoradas através de um microscópio invertido de contraste de fase paralelamente gravadas em um microcomputador, sendo que, as alterações morfométricas foram analisadas através de um software (Image Pro Lite - Media Cybernetics). Os resultados indicam que estas células quando expostas a solução isotônica (260mOsm/kg'H IND.2 O')com adição tanto de bumetanide (10'mü'M) como de DIDS (200'mü'M) não sofrem alterações significtivas em seu volume, indicando uma aparente quiescência dos mesmos no estado de equilíbrio. Contudo, na presença de ouabaína (1mM) verificou-se uma redução no volume de aproximadamente 10%, a qual foi mantida até o final do experimento. A exposição destas células a choques hipertônicos (350mOsm/kg'H IND.2 O'), tanto em soluções obtidas pela adição de íons permeantes (NaCl) como de compostos impermeantes (sacarose), indica um comportamento inicial de redução em seu volume, comportando-se de maneira semelhante a um osmômetro e em seguida exibem RVI primária> Quando os inibidores bumetanide (10'mü'M), HMA (100'mü'M), DIDS (200'mü'M) e ouabaína (1mM), foram adicionados àsolução hipertônica obtida pela adição de NaCl as células tiveram uma redução de volume que variou de 17 a 23,3%, contudo, não foram capazes de exibir RVI o que indica participação do cotransporte 'Na POT.+'-'K POT.+' -2'Cl POT.-', dos trocadores acoplados 'Na POT.+'/'H POT.+' e 'Cl POT.-'/'HCO IND.3 POT.-' da bomba 'Na POT.+'-'K POT.+'-ATPase na RVI destas células
- Imprenta:
- Data da defesa: 12.07.2002
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ABNT
MACFADEM, Silvia Regina Mendes. Regulação de volume em células de melanoma murino, linhagem S-91: aumento regulatório de volume (RVI). 2002. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2002. . Acesso em: 18 abr. 2024. -
APA
Macfadem, S. R. M. (2002). Regulação de volume em células de melanoma murino, linhagem S-91: aumento regulatório de volume (RVI) (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Macfadem SRM. Regulação de volume em células de melanoma murino, linhagem S-91: aumento regulatório de volume (RVI). 2002 ;[citado 2024 abr. 18 ] -
Vancouver
Macfadem SRM. Regulação de volume em células de melanoma murino, linhagem S-91: aumento regulatório de volume (RVI). 2002 ;[citado 2024 abr. 18 ]
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