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Estudos comparativos das ß-xilosidases produzidas por Aspergillus versicolor cultivado em xilana ou xilose como únicas fontes de carbono (2002)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: ANDRADE, SARAH DE VARGAS - FFCLRP
  • USP Schools: FFCLRP
  • Sigla do Departamento: 592
  • Subjects: ASPERGILLUS; BIOLOGIA
  • Language: Português
  • Abstract: A xilana é o principal componente hemicelulósico das plantas e depois da celulose é a mais abundante fonte de carbono na natureza. A hidrólise completa da xilana ocorre pela ação sinergística de um complexo sistema de enzimas xilanolíticas (xilanases, ß-xilosidases, 'alfa'-arabinosidases, entre outras) encontrado em fungos e bactérias. O fungo filamentoso mesofílico Aspergillus versicolor produz altos níveis de atividade ß-xilosidásica quando cultivado em meio Vogel contendo xilana ou xilose como únicas fontes de carbono. O objetivo deste trabalho foi melhorar a caracterização do complexo xilanolítico de Aspergillus versicolor, purificando e caracterizando sua atividade ß-xilosidásica. Xilose e xilana foram os melhores indutores da ß-xilosidase. Resíduos agro-industriais como farelo de trigo, bagaço de cana e sabugo de milho também foram bons indutores da enzima. As ß-xilosidases induzidas por xilose ou xilana foram purificadas utilizando um procedimento simples que envolveu uma coluna de troca iônica DEAE- celulose, precipitação com sulfato de amônio e diálise. As temperaturas ótimas para dosagem da ß-xilosidase foram 40 e 45°C para as enzimas induzidas por xilose e xilana, respectivamente. O pH ótimo para a ß-xilosidase induzi da por xilose foi 6,0 e para ß-xilosidase induzida por xilana foi 5,5. A análise eletroforética em PAGE para proteínas ácidas revelou a presença de apenas uma banda para cada preparação. Análises em SDS-PAGE revelaram a presençade três bandas para cada uma das enzimas. As bandas encontradas para a ß-xilosidase induzi da por xilose correspondem a 110, 60 e 50 kDa, enquanto as da ß-xilosidase induzida por xilana correspondem a 109, 62 e 57 kDa. As ß-xilosidases de A. versicolor são glicoproteínas com conteúdos de carboidratos de 21 e 47% para as enzimas induzidas por xilose e xilana, respectivamente. O ponto isoelétrico das duas ß-xilosidases é de 6,12. As duas enzimas foram ativa- ) das por cálcio, bário e cobalto, porém a ß-xilosidase induzida por xilana mostrou-se mais sensível aos íons testados. As ß-xilosidases apresentaram atividades galactosidásica, glucosidásica e arabinosidásica. A ß-xilosidase induzida por xilose hidrolisou em ordem crescente: PNP-gal, PNP-glu, 'alfa'-PNP-ara e PNP-xil. A ß-xilosidase induzida por xilana hidrolisou em ordem crescente: PNP-gal, 'alfa'-PNP-ara, PNP-glu e PNP-xil. As ß-xilosidases purificadas hidrolisaram xilobiose e xilotriose, além dos substratos sintéticos mostrando assim, funções fisiológicas. Estudos cinéticos revelaram um Km de 0,3 mM para a ß-xilosidase induzida por xilose e 0,19 mM para a ß-xilosidase induzida por xilana. Análises de cromatografia em camada delgada de sílica gel mostraram que há um sinergismo entre as enzimas xilanolíticas de A. versicolor, não havendo acúmulo de xilooligossacarídeos no meio de cultivo. As diferenças exibidas pelas ß-xilosidases são atribuídas a glicosilação diferencial causada pela diferença da qualidade dafonte de carbono oferecida ao fungo durante o cultivo
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 20.06.2002

  • Exemplares físicos disponíveis nas Bibliotecas da USP
    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    FCLRP20800021567Andrade, Sarah de Vargas
    How to cite
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    • ABNT

      ANDRADE, Sarah de Vargas; JORGE, João Atílio. Estudos comparativos das ß-xilosidases produzidas por Aspergillus versicolor cultivado em xilana ou xilose como únicas fontes de carbono. 2002.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2002.
    • APA

      Andrade, S. de V., & Jorge, J. A. (2002). Estudos comparativos das ß-xilosidases produzidas por Aspergillus versicolor cultivado em xilana ou xilose como únicas fontes de carbono. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Andrade S de V, Jorge JA. Estudos comparativos das ß-xilosidases produzidas por Aspergillus versicolor cultivado em xilana ou xilose como únicas fontes de carbono. 2002 ;
    • Vancouver

      Andrade S de V, Jorge JA. Estudos comparativos das ß-xilosidases produzidas por Aspergillus versicolor cultivado em xilana ou xilose como únicas fontes de carbono. 2002 ;

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