Desenvolvimento de método de transformação genética para diferentes espécies de levedura (2003)
- Authors:
- Autor USP: VICENTE, ELISABETE JOSE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: Determinar a capacidade de transformação do vetor pUCGC em diferentes espécies de leveduras de interesse biotecnológicos e leveduras filogeneticamente próximas a Saccharomyces cerevisiae. Métodos e Resultados: Por ser um organismo eucarionte, a levedura é capaz de realizar modificações pós-traducionais das proteínas. Conseqüentemente a levedura apresenta enormes vantagens para ser empregada como hospedeira de plasmídios recombinantes portadores de informações genéticas provenientes de outros organismos. Neste trabalho foram utilizadas linhagens selecionadas de Saccharomyces cerevisie, Schizosaccharomyces pombe, Pichia pastoris, Cândida tropicalis. Estas linhagens foram transformadas pelo método de Acetato de Lítio, utilizando-se como vetor de transformação que contém o fragmento CGC, 7,8Kb, cassete de expressão contendo o cDNA da glicoamilase de Aspergillus awamori (Camargo, 2001).Este vetor possui as extremidades do gene CAN 1 de Saccharomyces cerevisiae através de recombinação homóloga e causa a disrupção gênica pela sua integração na região homóloga ao gene CAN 1. Linhagens de levedura com o gene alelo CAN 1 funcional são sensíveis à um aminoácido básico análogo da arginina, a L-canavanina, um potente inibidor de crescimento de muitos microrganismos. Após a transformação, a seleção dos transformantes foi feita pelo cultivo em meio mínimo SD, acrescido de L-canavanina, sendo analisados quanto à capacidade deproduzir halos de amilolise em meio sólido contendo 0,5% de amido. Para a seleção dos transformantes, as diferentes linhagens de levedura precisam ser incubadas por diferentes períodos de tempo. Até o momento, já foram transformadas com sucesso várias linhagens de Saccharomyces cerevisiae de procedência industrial Conclusão: O método apresentado se mostrou eficiente para a transformação de várias leveduras selvagens selecionadas
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Pesquisa do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2003
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso Instituto Ciências Biomédicas, IV
-
ABNT
MELO, Juliana Ferreira de e VICENTE, Elisabete José e CAMARGO, M. E. Desenvolvimento de método de transformação genética para diferentes espécies de levedura. 2003, Anais.. São Paulo: Comissão de Pesquisa do ICB/USP, 2003. . Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Melo, J. F. de, Vicente, E. J., & Camargo, M. E. (2003). Desenvolvimento de método de transformação genética para diferentes espécies de levedura. In Resumos. São Paulo: Comissão de Pesquisa do ICB/USP. -
NLM
Melo JF de, Vicente EJ, Camargo ME. Desenvolvimento de método de transformação genética para diferentes espécies de levedura. Resumos. 2003 ;[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Melo JF de, Vicente EJ, Camargo ME. Desenvolvimento de método de transformação genética para diferentes espécies de levedura. Resumos. 2003 ;[citado 2024 abr. 23 ] - Clones recombinantes retrotransformantes obtidos em linhagens de leveduras Saccharomyces cerevisiae transformadas com plasmídio bifuncional PGTY-glico
- A novel system of genetic transformation allows multiple integrations of a desired gene in Saccharomyces cerevisiae chromosomes
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