Utilização de transposons para identificação e caracterização de genes em Leishmania major (2003)
- Authors:
- Autor USP: AUGUSTO, MARLEI JOSIELE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: LEISHMANIA (GENÉTICA); IMUNOPARASITOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: O seqüenciamento em larga escala do genoma do protozoário parasita Leishmania vem gerando uma vasta quantidade de informação. O uso da informação gerada depende do desenvolvimento de estratégias genéticas e bioquímicas que possibilitem a caracterização sistemática da expressão de genes e das relações metabólicas estabelecidas entre seus produtos. Assim, os esforços da pesquisa genômica se concentram na definição de estratégias capazes de estabelecer uma ligação segura entre o genoma e os transcriptoma, proteoma e metaboloma incidentais. A utilização de elementos de transposição como armadilha de genes é uma estratégia poderosa para estudos funcionais em diversos projetos de caracterização de genomas. Em muitos casos os transposons podem ser modificados, controlados e utilizados na caracterização da expressão de genes. A estratégia que implementamos utiliza o sistema mariner de transposição in vitro. Este sistema é baseado no uso do transposon Mos1, encontrado no genoma de Drosophila mauritiana. Uma versão modificada deste transposon contém o gene da Neomicina Fosfotransferase (NPT) como gene repórter. O gene NPT é expresso no parasita somente quando inserido na fase aberta de leitura de um gene. Bibliotecas genômicas submetidas a inserções do transposon /NEO*SAT foram transfectadas em Leishmania e a expressão do gene repórter permitiu a seleção de parasitas resistente ao aminoglicosídeo G418. Via de regra, os transfectantes resistentes à droga carregamepissomos onde as inserções colocam o gene repórter na orientação e fase aberta de leitura corretas de um gene predito de Leishmania. Além de funcionar como armadilha da expressão de genes do parasita a estratégia permite a localização subcelular de seus produtos. Os produtos de fusão do gene repórter a genes de função desconhecida são detectados por um protocolo de microscopia de imunofluorescência que utiliza um anticorpo anti-NPT. O trabalho desenvolvido .. representa uma das primeiras tentativas de caracterização funcional sistemática do genoma do protozoário parasita Leishmania
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2003
- Data da defesa: 25.04.2003
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ABNT
AUGUSTO, Marlei Josieli. Utilização de transposons para identificação e caracterização de genes em Leishmania major. 2003. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2003. . Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Augusto, M. J. (2003). Utilização de transposons para identificação e caracterização de genes em Leishmania major (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Augusto MJ. Utilização de transposons para identificação e caracterização de genes em Leishmania major. 2003 ;[citado 2024 mar. 28 ] -
Vancouver
Augusto MJ. Utilização de transposons para identificação e caracterização de genes em Leishmania major. 2003 ;[citado 2024 mar. 28 ] - Análise funcional e caracterizaçao do gene LmF23.0310 de Leishmania major presente em uma região amplificável em resposta à pressão por drogas
- The expression of Leishmania major tagged genes is dependent on genome context
- Riboflavin (vitamin B-2) reduces hepatocellular injury following liver ischaemia and reperfusion in mice
- Rosmarinic acid attenuates hepatic ischemia and reperfusion injury in rats
- Investigation of a possible telomere-position effect in the expression of Leishmania genes
- Production, purification and characterization of a polygalacturonase produced by Neosartorya glabra
- Effect of gallic acid on regression of murine CCL4-induced hepatic cirrhosis
- Nonalcoholic steatohepatitis: a search for factual animal models
- Comparison of different blockages on the renin angiotensin system in murine schistosomal fibrosis
- Can coconut oil promote non-alcoholic steatohepatitis and metabolic syndrome? A timely review
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