Colchicina inibe ação da AVP no tráfego de vesículas ácidas subcelulares, em células MDCK (2004)
- Authors:
- USP affiliated authors: MALNIC, GERHARD - ICB ; AIRES, MARGARIDA DE MELLO - ICB ; SOUZA, MARIA OLIVEIRA DE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivo: Estudos anteriores de nosso laboratório demonstraram efeito estimulatório da AVP sobre a migração exocitótica de vesículas ácidas subcelulares carregadoras de H+-ATPase. O objetivo do presente trabalho foi investigar o envolvimento do citoesqueleto nesse efeito hormonal, em células MDCK (originárias de néfron distal de cão). Métodos e Resultados: O movimento das vesículas ácidas foi monitorado por meio de microscópio confocal (Zeiss LSM 510, objetiva 63X) durante o período de recuperação do pH intracelular após pulso ácido por NH4Cl. Os experimentos foram realizados na vigência de meio extracelular sem Na+ e com baixa concentração de K+, para inibição do trocador Na+/H+ e da H+/K+ ATPase, respectivamente. Como marcador das vesículas ácidas foi usado o acridine orange (5mm, 30s) , substância difusível que se concentra em organelas subcelulares ácidas e emite fluorescência após excitação a 490 nm. As células foram pré-tratadas com colchicina (10mM, 2h, 37°C), agente desorganizador dos microtúbulos, sendo a AVP (10-12 ou 10-6M) aplicada após o pulso ácido. O movimento vesicular foi monitorado em 10 células, durante 10 minutos, pelo deslocamento da densidade de fluorescência da região basolateral para a apical. O processo foi quantificado pela inclinação da reta traçada com as razões da densidade de fluorescência apical/basolateral (DFap/DFbl) ao longo do tempo. Na situação controle, a razão DFap/DFbl foi de 0.081 ± 0.003/min; na presença de AVP 10-12M foi de0.333 ± 0.039/min e na presença de AVP 10-6M foi de 0.589 ± 0.008/min. A colchicina inibiu o efeito estimulatório de ambas as doses de AVP, de modo que a razão DFap/DFbl na vigência do hormônio mais colchicina não foi significativamente diferente do controle. Conclusões: Nossos resultados sugerem a participação do citoesqueleto no efeito estimulador da AVP sobre a migração exocitótica de vesículas ácidas carregadoras de H+-ATPase
- Imprenta:
- Publisher place: Águas de Lindóia
- Date published: 2004
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE
-
ABNT
MORETHSON, P. et al. Colchicina inibe ação da AVP no tráfego de vesículas ácidas subcelulares, em células MDCK. 2004, Anais.. Águas de Lindóia: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo, 2004. . Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Morethson, P., Oliveira-Souza, M., Malnic, G., & Aires, M. de M. (2004). Colchicina inibe ação da AVP no tráfego de vesículas ácidas subcelulares, em células MDCK. In Resumos. Águas de Lindóia: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. -
NLM
Morethson P, Oliveira-Souza M, Malnic G, Aires M de M. Colchicina inibe ação da AVP no tráfego de vesículas ácidas subcelulares, em células MDCK. Resumos. 2004 ;[citado 2024 mar. 28 ] -
Vancouver
Morethson P, Oliveira-Souza M, Malnic G, Aires M de M. Colchicina inibe ação da AVP no tráfego de vesículas ácidas subcelulares, em células MDCK. Resumos. 2004 ;[citado 2024 mar. 28 ] - Arginine vasopressin stimulates H+ - ATPase in MDCK cells via V1 (cell Ca2+) and V2 (cAMP) receptors
- Colchicine impairs the dose-dependent stimulatory effect of ANG II or AVP on acid subcellular vesicle traafficking in MDCK cells
- ANP impairs the dose-dependent stimulatory effect of ANG II or AVP on H+-ATPase subcellular vesicle trafficking
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