Efeito imunoestimulador da vacina DNA-hsp65 sobre macrófagos e células dendríticas humanas (2005)
- Authors:
- Autor USP: FRANCO, LUIS HENRIQUE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Assunto: IMUNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: A vacina DNA-hsp65, construção pcDNA3-hsp65, na qual foi inserido o gene que codifica a proteína de choque térmico de 65 kDa (hsp65, do inglês Heat Shock Protein 65 kDa) de Mycobacterium leprae apresentou atividade profilática e terapêutica contra a tuberculose experimental. O vetor plasmideal usado na construção desta vacina (pCDNA3) não é liberado para uso clínico pelo fato de conter o gene que confere resistência à ampicilina. Uma nova construção vacinal foi desenvolvida clonando-se o gene da hsp65 no vetor pVAX (DNA-hsp65, construção pVAX-hsp65), que contém o gene de resistência à kanamicina, sendo liberado para ensaios clínicos. A vacina DNA-hsp65 (pVAX-hsp65) está sendo testada pelo nosso grupo, integrantes do Centro de Pesquisas em Tuberculose da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto -USP (CPT-FMRP-USP) em modelo animal, numa abordagem comparativa para testar sua eficácia protetora em relação à construção vacinal pcDNA3-hsp65. No presente trabalho, nosso objetivo constituiu em avaliar o potencial imunoestimulatório da vacina DNA-hsp65 (pVAX-hsp65) sobre células humanas, mais especificamente sobre macrófagos e células dendríticas. Estas células apresentadoras de antígenos (APC, do inglês Antigen Presenting Cell) exercem funções essenciais na ativação da resposta imune contra M. tuberculosis. Nossos resultados mostraram que após 4 horas de estimulação com DNA- hsp65, tanto macrófagos quanto células dendríticas foram capazes de capturar a vacina de DNA. Ambas aspopulações celulares expressaram o RNAm para a hsp65, além de apresentarem elevada expressão constitutiva de TLR9 intracelular. Após 48 horas de estimulação, células dendríticas apresentaram regulação positiva na expressão dos receptores CD80 e CD86 e produziram concentrações significativas de IL-12. Em contra partida, macrófagos não apresentaram alterações no fenótipo celular e nem secretaram IL-12. No entanto, foram capazes de produzir ... concentrações significativas de IL-6, TNF-'alfa' e IL-10. Verificamos também que macrófagos estimulados com a vacina DNA-hsp65 foram mais eficientes em restringir o crescimento de M. tuberculosis após infecção in vitro, em relação às células dendríticas submetidas ao mesmo estímulo. Em uma outra abordagem do nosso trabalho, analisamos também a capacidade imunoestimulatória das proteínas do filtrado de cultura de Mycobacterium tuberculosis, descritas como PFC, sobre macrófagos e células dendríticas. Essas proteínas são descritas como antígenos imunodominantes na tuberculose e também têm sido estudadas como alvos potenciais para o desenvolvimento de novas vacinas. Macrófagos estimulados com PFC secretaram níveis elevados de TNF-'alfa', IL-6, e IL-10, e não secretaram IL-12, enquanto células dendríticas secretaram níveis elevados de IL-12 e IP-10. Quanto aos marcadores de superfície, macrófagos estimulados com PFC acrescidas de motivos CpG, apresentaram modulação positiva na expressão de m CD86,enquanto células dendríticas estimuladas apenas com PFC também apresentaram aumento na expressão deste receptor. Os resultados apresentados neste trabalho mostram, pela primeira vez, que uma vacina de DNA, cujo efeito profilático e terapêutico descrito contra a TB experimental, foi capaz de ativar células apresentadora de antígenos humanas de modo distinto
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2005
- Data da defesa: 24.05.2005
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ABNT
FRANCO, Luís Henrique. Efeito imunoestimulador da vacina DNA-hsp65 sobre macrófagos e células dendríticas humanas. 2005. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2005. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Franco, L. H. (2005). Efeito imunoestimulador da vacina DNA-hsp65 sobre macrófagos e células dendríticas humanas (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Franco LH. Efeito imunoestimulador da vacina DNA-hsp65 sobre macrófagos e células dendríticas humanas. 2005 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Franco LH. Efeito imunoestimulador da vacina DNA-hsp65 sobre macrófagos e células dendríticas humanas. 2005 ;[citado 2024 abr. 24 ]
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